[发明专利]寡核苷酸组合物及其方法

权利要求书

1.寡核苷酸组合物，其包含通过以下定义的特定寡核苷酸类型的第一多种寡核苷酸：

1)碱基序列；

2)骨架键联样式；

3)骨架手性中心样式；和

4)骨架磷修饰样式，

所述组合物是手性控制的，即与具有相同碱基序列的寡核苷酸的基本上外消旋的制备物相比，所述组合物富含所述特定寡核苷酸类型的寡核苷酸，其中：

所述特定类型的寡核苷酸包含至少2个手性控制的硫代磷酸酯核苷酸间键联；

所述特定寡核苷酸类型的寡核苷酸各自包含在5’端的2′-F糖修饰的第一嵌段，以及在3’端的2′-F糖修饰的第二嵌段，其各自独立地包含2个或更多个连续2′-F糖修饰；以及

所述寡核苷酸组合物的特征在于，当使其在转录物剪接系统中与转录物接触时，所述转录物的剪接与参照条件下所观察到的相比发生改变，所述参照条件选自：不存在所述组合物、存在参照组合物、及其组合；并且

其中所述碱基序列包含与肌养蛋白基因的长度为20个碱基之部分或其互补物具有不超过5个错配的序列，长度为不超过50个碱基，所述骨架手性中心样式包含至少三个独立地为Rp或Sp的手性控制中心，并且所述特定寡核苷酸类型的寡核苷酸能够介导肌养蛋白基因的外显子的跳读。

2.权利要求1所述的组合物，其中与参照条件下所观察到的相比，期望的剪接产物提高2倍或更多。

3.权利要求1所述的组合物，其中所述参照条件是不存在所述组合物。

4.权利要求2所述的组合物，其中所述参照条件是不存在所述组合物。

5.权利要求1至4中任一项所述的组合物，其中所述骨架键联样式包含一个或更多个选自磷酸二酯和二硫代磷酸酯键联的骨架键联。

6.权利要求1所述的组合物，其中所述特定寡核苷酸类型的寡核苷酸各自包含：

1)5’端区，其包含2、3、4、5、6、7、8、9、10个或更多个含有2’-F修饰糖部分的核苷单元；

2)3’端区，其包含2、3、4、5、6、7、8、9、10个或更多个含有2’-F修饰糖部分的核苷单元；和

3)在所述5’端区与所述3’区之间的中间区，其包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10个或更多个含有磷酸二酯键联的核苷酸单元。

7.权利要求6所述的组合物，其中所述5’端区包含1个或更多个不含2’-F修饰糖部分的核苷单元；所述3’端区包含1个或更多个不含2’-F修饰糖部分的核苷单元；和/或所述中间区包含1个或更多个不含磷酸二酯键联的核苷酸单元。

8.权利要求6所述的组合物，其中在5’端区与3’端区之间的中间区包含两个或更多个2’-OR¹修饰的糖部分，其中在所述中间区中的2’-OR¹修饰的糖部分不是连续的并且R¹是任选地经取代的C_1-6烷基。

9.权利要求8所述的组合物，其中R¹是甲基。

10.权利要求6所述的组合物，其中5’端区的所述2、3、4、5、6、7、8、9、10个或更多个含有2’-F修饰糖部分和经修饰核苷酸间键联的核苷单元中的第一个是所述寡核苷酸从5’端开始的第一个、第二个、第三个、第四个或第五个核苷单元，并且3’端区的所述2、3、4、5、6、7、8、9、10个或更多个含有2’-F修饰糖部分和经修饰核苷酸间键联的核苷单元中的最后一个是所述寡核苷酸的最后一个、倒数第二个、倒数第三个、倒数第四个或倒数第五个核苷单元。

11.权利要求6所述的组合物，其中所述5’端区包含4、5、6、7、8、9、10个或更多个连续的含有2’-F修饰糖部分的核苷单元，并且所述3’端区包含4、5、6、7、8、9、10个或更多个连续的含有2’-F修饰糖部分的核苷单元。