[发明专利]表达嵌合抗原受体的修饰单核细胞/巨噬细胞及其用途

说明书

本发明包括用于治疗癌症——无论实体肿瘤还是血液恶性病——的方法和组合物。通过在单核细胞、巨噬细胞或树突状细胞中表达嵌合抗原受体，修饰的细胞被募集到肿瘤微环境，在此其通过浸润肿瘤和杀死靶细胞而充当有效的免疫效应物。一个方面包括修饰的细胞和包含该修饰的细胞的药物组合物，用于过继性细胞疗法和治疗与免疫抑制相关的疾病或状况。

相关申请的交叉引用

本申请根据35 U.S.C.§119(e)有权要求2015年7月28日提交的美国临时专利申请No.62/197,675的优先权，其整体通过引用被并入在此。

发明背景

癌症免疫治疗已经在多种实体肿瘤和血液恶性病(hematologic malignancies)的设定中被证实具有令人激动的临床结果。内源性免疫系统一般对恶性细胞不具有反应性，或者关于身体对于恶性细胞存在的反应可以具有积极免疫抑制性。增强肿瘤治疗的一种方式是通过白细胞基因改造来迫使免疫系统进行肿瘤识别。可以将T细胞改造以表达包含细胞外目标抗体和细胞内信号传导结构域的合成免疫受体，其被称为嵌合抗原受体(CAR)。已经显示表达针对CD19的CAR的T细胞具有显著的抗白血病效力，其中已经在90％的被治疗急性淋巴母细胞白血病患者中实现了完全缓解(Maude,et al.,NEJM,vol.371:1507-17,2014)。这些结果伴随着的T细胞增殖和明确记录的T细胞在如此治疗的白血病患者的肿瘤部位中的浸润。尽管在造血系统恶性病中证实了高响应率，但实体肿瘤中(以及在某些淋巴肿瘤中)的CAR T细胞功效可能有限。对此可能的解释包括T细胞浸润实体肿瘤的能力可能削弱、通行不良、免疫抑制性肿瘤微环境和实体肿瘤细胞上极少肿瘤特异性表达。

本领域需要更有效的组合物和通过这种组合物提高对肿瘤细胞的特异性和提高在实体肿瘤和血液恶性病中的肿瘤部位中的浸润来治疗癌症的方法。本发明满足了这种需要。

发明概述

如本文所公开的，本发明包括应用具有目标效应活性的吞噬细胞的组合物和方法。

一方面，本发明包括包含嵌合抗原受体(CAR)的修饰细胞，其中CAR包含抗原结合结构域、跨膜结构域和刺激和/或共刺激分子细胞内结构域，并且其中细胞是具有目标效应活性的单核细胞、巨噬细胞或树突状细胞。

另一方面，本发明包括包含编码嵌合抗原受体(CAR)的核酸序列的修饰细胞，其中核酸序列包含编码抗原结合结构域的核酸序列、编码跨膜结构域的核酸序列和编码刺激和/或共刺激分子细胞内结构域的核酸序列，并且其中细胞是表达CAR并具有目标效应活性的单核细胞、巨噬细胞或树突状细胞。

再另一方面，本发明包括对细胞进行修饰的方法，包括将嵌合抗原受体(CAR)引入单核细胞、巨噬细胞或树突状细胞中，其中CAR包含抗原结合结构域、跨膜结构域和刺激和/或共刺激分子细胞内结构域，并且其中细胞是表达CAR并具有目标效应活性的单核细胞、巨噬细胞或树突状细胞。

又一方面，本发明包括包含根据本文所述的方法修饰的细胞的组合物。

在本文所述的本发明的上述方面或任何其它方面的各种实施方式中，CAR的抗原结合结构域包含选自单克隆抗体、多克隆抗体、合成抗体、人抗体、人源化抗体、单域抗体、单链可变片段和其抗原结合片段的抗体。在另一实施方式中，CAR的抗原结合结构域选自抗CD 19抗体、抗HER2抗体和其片段。在又一实施方式中，CAR的细胞内结构域包含双重信号传导结构域。

在另一实施方式中，目标效应活性针对特异性结合CAR的抗原结合结构域的、靶细胞上的抗原。在又一实施方式中，目标效应活性选自吞噬、目标的细胞的细胞毒性(targeted cellular cytotoxicity)、抗原呈递和细胞因子分泌。