[发明专利]用于产生线性聚α‑1，3‑葡聚糖的葡糖基转移酶氨基酸序列基序

权利要求书

1.一种反应溶液，该反应溶液包含水、蔗糖、和葡糖基转移酶，其中所述葡糖基转移酶包含催化结构域，所述催化结构域包含以下三种基序：

(i)包含与SEQ ID NO：78具有至少90％同一性的氨基酸序列的基序，

(ii)包含与SEQ ID NO：79具有至少90％同一性的氨基酸序列的基序，和

(iii)包含与SEQ ID NO：80具有至少90％同一性的氨基酸序列的基序；

其中所述葡糖基转移酶不包含SEQ ID NO：65的残基54-957、SEQ ID NO：30的残基55-960、SEQ ID NO：4的残基55-960、SEQ ID NO：28的残基55-960、或SEQ ID NO：20的残基55-960；

并且其中所述葡糖基转移酶产生具有至少95％α-1，3糖苷键且重均聚合度(DP_w)为至少100的不溶性聚α-1，3-葡聚糖。

2.如权利要求1所述的反应溶液，其中所述催化结构域包含与SEQ ID NO：65的氨基酸位置54-957具有至少90％同一性的氨基酸序列。

3.如权利要求2所述的反应溶液，其中：

(A)与SEQ ID NO：78具有至少90％同一性的氨基酸序列的位置与SEQ ID NO：65的氨基酸位置231-243对齐；

(B)与SEQ ID NO：79具有至少90％同一性的氨基酸序列的位置与SEQ ID NO：65的氨基酸位置396-425对齐；和/或

(C)与SEQ ID NO：80具有至少90％同一性的氨基酸序列的位置与SEQ ID NO：65的氨基酸位置549-567对齐。

4.如权利要求1所述的反应溶液，其中基序(i)包含SEQ ID NO：78，基序(ii)包含SEQ ID NO：79，并且基序(iii)包含SEQ ID NO：80。

5.如权利要求1所述的反应溶液，其中所述葡糖基转移酶合成具有100％α-1，3糖苷键的聚α-1，3-葡聚糖。

6.如权利要求1所述的反应溶液，其中所述葡糖基转移酶合成具有DP_w为至少400的聚α-1，3-葡聚糖。

7.一种产生不溶性聚α-1，3-葡聚糖的方法，所述方法包括：

(a)接触至少水、蔗糖、和葡糖基转移酶，其中所述葡糖基转移酶包含催化结构域，所述催化结构域包含以下三种基序：

(i)包含与SEQ ID NO：78具有至少90％同一性的氨基酸序列的基序，

(ii)包含与SEQ ID NO：79具有至少90％同一性的氨基酸序列的基序，和

(iii)包含与SEQ ID NO：80具有至少90％同一性的氨基酸序列的基序，

并且其中所述葡糖基转移酶不包含SEQ ID NO：65的残基54-957、SEQ ID NO：30的残基55-960、SEQ ID NO：4的残基55-960、SEQ ID NO：28的残基55-960、或SEQ ID NO：20的残基55-960；

由此产生具有至少95％α-1，3糖苷键且重均聚合度(DP_w)为至少100的不溶性聚α-1，3-葡聚糖；和

b)任选地，分离在步骤(a)中产生的聚α-1，3-葡聚糖。

8.如权利要求7所述的方法，其中所述催化结构域包含与SEQ ID NO：65的氨基酸位置54-957具有至少90％同一性的氨基酸序列。

9.如权利要求8所述的方法，其中：

(1)与SEQ ID NO：78具有至少90％同一性的氨基酸序列的位置与SEQ ID NO：65的氨基酸位置231-243对齐；

(2)与SEQ ID NO：79具有至少90％同一性的氨基酸序列的位置与SEQ ID NO：65的氨基酸位置396-425对齐；和/或

(3)与SEQ ID NO：80具有至少90％同一性的氨基酸序列的位置与SEQ ID NO：65的氨基酸位置549-567对齐。

10.如权利要求7所述的方法，其中基序(i)包含SEQ ID NO：78，基序(ii)包含SEQ ID NO：79，并且基序(iii)包含SEQ ID NO：80。