[发明专利]适合用于液化中的具有普鲁兰酶活性的多肽在审

专利信息
申请号: 201680042117.3 申请日: 2016-07-11
公开(公告)号: CN107922933A 公开(公告)日: 2018-04-17
发明(设计)人: S.克拉克;松井知子;富木亚纪 申请(专利权)人: 诺维信公司
主分类号: C12N9/44 分类号: C12N9/44
代理公司: 北京市柳沈律师事务所11105 代理人: 凃滔,张文辉
地址: 丹麦*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 适合 用于 液化 中的 具有 普鲁兰酶 活性 多肽
【权利要求书】:

1.一种变体普鲁兰酶,其中该普鲁兰酶至少包含以下取代组合:

N368G+N393A+Q431E+L432F+A492A,S+N610R+G624S+T631S+S632C,并且任选地进一步包含N222P+Q252A+Q256R;其中该变体具有普鲁兰酶活性,并且其中所述变体与SEQ ID NO:3的多肽具有至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%,但小于100%的序列一致性。

2.根据权利要求1所述的变体,其中当在76℃下测量时,相对于在65℃下的活性,所述变体具有至少30%的相对活性。

3.根据权利要求1所述的变体,其中该变体普鲁兰酶进一步包含N20G+Y28K+H80Y+Q187R+E310A+D311K+Q387L+Q459G+D586S+E699R+S798R。

4.根据权利要求1和3所述的变体,其中当在78℃下测量时,相对于在65℃下的活性,所述变体具有至少50%的相对活性。

5.根据权利要求3所述的变体,其中该变体包含以下取代组合:

N222P+Q252A+Q256R+N368G+N393A+Q431E+L432F+A492A+N610R+G624S+T631S+S632C+N20G+Y28K+H80Y+Q187R+E310A+D311K+Q387L+Q459G+D586S+E699R+S798R;

并且该变体进一步包含以下缺失和取代组合之一:

P30*+V31*+N32*;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N197T;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N202K;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A345P;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+M402S;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+F456W;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+I460V;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N479H;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+I514V;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+E560R;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+D615E;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A345P+E560R;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A345P+I514V;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A345P+I460V+I514V;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+I460V+I514V;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N202K+A345P+E560R;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A345P+M402S+E560R;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N202K+A345P+M402S+E560R;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N202K+A345P+M402S+I460V+I514V;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+F456W;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+I460V+I514V;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N202K+A345P+M402S+I460V+I514V;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N202K+A345P+M402S+I460V+I514V+E560R;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N202K+A345P+M402S+I460V+I514V+E560R+D615E;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+M402S+I460V+I514V+E560R;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+M402S+I514V;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+F456W;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+M402S+F456W+I460V+I514V;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N479H;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+M402S+F456W+I460V+I514V+E560R;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+M402S+I460V+N479H+I514V+E560R;

P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N197T+A345P+M402S+I460V+I514V+E560R;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A252I+N202K+A345P+M402S+I460V+I514V+E560R;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N197T+N202K+A345P+M402S+I460V+I514V+E560R;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N202K+A345P+M402S+F456W+I460V+I514V+E560R;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N197T+A345P+M402S+F456W+I460V+I514V+E560R;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+M402S+F456W+I460V+N479H+I514V+E560R;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N197T+N202K+A345P+M402S+F456W+I460V+I514V+E560R;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N202K+A345P+M402S+F456W+I460V+N479H+I514V+E560R;

Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N197T+N202K+A345P+M402S+F456W+I460V+N479H+I514V+E560R;并且

其中该变体具有普鲁兰酶活性,并且所述变体与SEQ ID NO:3的多肽具有至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%,但小于100%的序列一致性,并且其中当在78℃下测量时,相对于在65℃下的活性,所述变体具有至少50%,具体地至少60%,更具体地至少70%,甚至更具体地至少80%的相对活性。

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