[发明专利]适合用于液化中的具有普鲁兰酶活性的多肽在审
申请号: | 201680042117.3 | 申请日: | 2016-07-11 |
公开(公告)号: | CN107922933A | 公开(公告)日: | 2018-04-17 |
发明(设计)人: | S.克拉克;松井知子;富木亚纪 | 申请(专利权)人: | 诺维信公司 |
主分类号: | C12N9/44 | 分类号: | C12N9/44 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所11105 | 代理人: | 凃滔,张文辉 |
地址: | 丹麦*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 适合 用于 液化 中的 具有 普鲁兰酶 活性 多肽 | ||
1.一种变体普鲁兰酶,其中该普鲁兰酶至少包含以下取代组合:
N368G+N393A+Q431E+L432F+A492A,S+N610R+G624S+T631S+S632C,并且任选地进一步包含N222P+Q252A+Q256R;其中该变体具有普鲁兰酶活性,并且其中所述变体与SEQ ID NO:3的多肽具有至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%,但小于100%的序列一致性。
2.根据权利要求1所述的变体,其中当在76℃下测量时,相对于在65℃下的活性,所述变体具有至少30%的相对活性。
3.根据权利要求1所述的变体,其中该变体普鲁兰酶进一步包含N20G+Y28K+H80Y+Q187R+E310A+D311K+Q387L+Q459G+D586S+E699R+S798R。
4.根据权利要求1和3所述的变体,其中当在78℃下测量时,相对于在65℃下的活性,所述变体具有至少50%的相对活性。
5.根据权利要求3所述的变体,其中该变体包含以下取代组合:
N222P+Q252A+Q256R+N368G+N393A+Q431E+L432F+A492A+N610R+G624S+T631S+S632C+N20G+Y28K+H80Y+Q187R+E310A+D311K+Q387L+Q459G+D586S+E699R+S798R;
并且该变体进一步包含以下缺失和取代组合之一:
P30*+V31*+N32*;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N197T;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N202K;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A345P;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+M402S;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+F456W;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+I460V;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N479H;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+I514V;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+E560R;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+D615E;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A345P+E560R;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A345P+I514V;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A345P+I460V+I514V;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+I460V+I514V;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N202K+A345P+E560R;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A345P+M402S+E560R;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N202K+A345P+M402S+E560R;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N202K+A345P+M402S+I460V+I514V;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+F456W;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+I460V+I514V;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N202K+A345P+M402S+I460V+I514V;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N202K+A345P+M402S+I460V+I514V+E560R;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N202K+A345P+M402S+I460V+I514V+E560R+D615E;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+M402S+I460V+I514V+E560R;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+M402S+I514V;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+F456W;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+M402S+F456W+I460V+I514V;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N479H;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+M402S+F456W+I460V+I514V+E560R;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+M402S+I460V+N479H+I514V+E560R;
P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+N197T+A345P+M402S+I460V+I514V+E560R;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A252I+N202K+A345P+M402S+I460V+I514V+E560R;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N197T+N202K+A345P+M402S+I460V+I514V+E560R;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N202K+A345P+M402S+F456W+I460V+I514V+E560R;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N197T+A345P+M402S+F456W+I460V+I514V+E560R;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+A345P+M402S+F456W+I460V+N479H+I514V+E560R;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N197T+N202K+A345P+M402S+F456W+I460V+I514V+E560R;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N202K+A345P+M402S+F456W+I460V+N479H+I514V+E560R;
Q29G+P30*+V31*+N32*+D57N+D58P+A195G+N197T+N202K+A345P+M402S+F456W+I460V+N479H+I514V+E560R;并且
其中该变体具有普鲁兰酶活性,并且所述变体与SEQ ID NO:3的多肽具有至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%,但小于100%的序列一致性,并且其中当在78℃下测量时,相对于在65℃下的活性,所述变体具有至少50%,具体地至少60%,更具体地至少70%,甚至更具体地至少80%的相对活性。
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