[发明专利]IL22免疫缀合物

说明书

本申请涉及包含白介素‑22(IL22)和抗体分子的缀合物。所述抗体分子优选地结合与血管发生相关的抗原，如纤维连接蛋白的ED‑A同种型。具体地，本申请涉及此类缀合物在治疗疾病/失调如包括炎性肠病(IBD)在内的自身免疫病中的治疗性用途。

技术领域

本发明涉及包含白介素-22(IL22)和抗体分子的缀合物。该抗体分子优选地结合与血管发生相关的抗原，如纤维连接蛋白的ED-A同种型。具体地，本发明涉及此类缀合物在治疗疾病/失调(如包括炎性肠病(IBD)的自身免疫病)中的治疗性用途。

背景技术

细胞因子是先天免疫和适应性免疫的关键介质。许多细胞因子已经在患者(如患有晚期癌症的患者)中被用于治疗性目的，但是其给药通常与严重的毒性相关，例如妨碍了剂量递增至治疗活性疗法以及它们作为抗癌药物的发展。为了克服这些问题，已经提出使用‘免疫细胞因子’(即与抗体或抗体片段融合的细胞因子)，目的是将免疫系统刺激活性集中在疾病部位，同时保留正常组织(Savage等人，1993；Schrama等人，2006；Neri等人，2005；Dela Cruz等人，2004；Reisfeld等人，1997；Konterman等人，2012)。

例如，若干种促炎性免疫细胞因子(例如，基于IL2、IL12、IL15、TNF的那些)已经显示在癌症的小鼠模型中展示有效的抗肿瘤作用(Borsi等人，2003；Carnemolla等人，2002；Frey等人，2010；Kaspar等人，2007；Pasche等人，2012)。相比之下，抗炎性免疫细胞因子(例如，基于IL10的那些)已经显示在慢性炎症病症的小鼠模型中赋予治疗益处(类风湿性关节炎、子宫内膜异位症[Schwager等人，2011；Schwager等人，2009])，但对肿瘤生长没有影响。

已经描述了特异于纤维连接蛋白和生腱蛋白-C的剪接异构体的抗体作为用于药物递送应用的载体，因为这些抗原在正常健康成年人(除了胎盘、子宫内膜和卵巢中的一些血管之外)中几乎检测不到，而在大多数实体瘤和淋巴瘤以及其他疾病中强烈表达(Brack等人，2006；Pedretti等人，2009；Schliemann等人，2009)。例如，分别针对纤连蛋白的可变剪接的EDA和EDB结构域具有特异性的抗体F8和L19以及抗腱生蛋白C抗体F16(Brack等，2006，Villa等，2008，Viti等，1999)已被用于开发武装抗体(armed antibodies)，其中一些已开始在肿瘤学和风湿病学中进行临床试验(Eigentler等人，2011；Papadia等人，2012)。这些抗体的肿瘤靶向特性在小鼠癌症模型和患者中也有记录。

白介素22(IL22)是属于IL-10家族的17kDa球状细胞因子，主要由NK细胞、树突细胞和T细胞分泌(Murphy 2012)。其含有两个分子内二硫键和三个N连接的糖基化位点。IL22的生物学功能包括参与组织保护、自身免疫和炎症。其通过固有层效应T细胞在肠道分泌、诱导粘蛋白产生、抗菌、增殖和抗凋亡途径，防止组织损伤和促进上皮修复(Li等人，2014)。我们调查了IL22是否可以成功地与血管靶向抗体融合。

细胞因子可被缀合至抗体分子以产生如上文提及的免疫细胞因子。然而，并不是所有的免疫细胞因子都保留了例如亲本抗体的体内靶向特性(Pasche和Neri 2012)或预期的活性。因此，制备具有治疗效果(如抗炎性活性)的免疫细胞因子远非如此简单。

包含融合至小鼠IL-22的N-端或C-端的小鼠IgG1Fc的缀合物的制备描述于Smith等人，2013中。制备这些缀合物是为了提供与rIL-22相比更有效和更持久的IL-22R激动剂。因此，Fc区在这种情况下的目的不是如先前段落描述的免疫细胞因子那样将IL22靶向疾病区。

发明陈述

本发明的诸位发明人已经显示，IL22可以缀合至结合ED-A的抗体，同时不仅保留了未缀合的抗体的靶向特性，而且还保留了IL22的生物学活性。