[发明专利]针对艰难梭状芽孢杆菌的免疫方法

权利要求书

1.一种针对表达艰难梭状芽孢杆菌(C. difficile)二元毒素(CDT)的艰难梭状芽孢杆菌菌株和不表达CDT的艰难梭状芽孢杆菌菌株免疫宿主的方法，该方法包括给予宿主包含纯化的艰难梭状芽孢杆菌毒素A和纯化的艰难梭状芽孢杆菌毒素B的免疫原性组合物，所述毒素通过用甲醛(w/v)于约15-32℃孵育约2-约21天灭活，其中毒素A用0.15%-0.5%甲醛(w/v)灭活和毒素B用0.15%-0.8%甲醛(w/v)灭活。

2.权利要求1的方法，其中纯化的艰难梭状芽孢杆菌毒素A和纯化的艰难梭状芽孢杆菌毒素B源自不表达艰难梭状芽孢杆菌二元毒素(CDT)的艰难梭状芽孢杆菌菌株。

3.权利要求2的方法，其中纯化的艰难梭状芽孢杆菌毒素A和纯化的艰难梭状芽孢杆菌毒素B源自艰难梭状芽孢杆菌菌株VPI10463 / ATCC43255。

4.一种在宿主中诱导抗体的方法，所述抗体具有对一种或多种表达艰难梭状芽孢杆菌二元毒素(CDT)的艰难梭状芽孢杆菌菌株的特异性，该方法包括给予宿主包含源自不表达CDT的艰难梭状芽孢杆菌菌株的灭活的纯化的艰难梭状芽孢杆菌毒素A和灭活的纯化的艰难梭状芽孢杆菌毒素B的组合物。

5.权利要求4的方法，其中所述抗体是中和性的，如通过毒素中和测定法所测定的。

6.权利要求5的方法，其中所述抗体显示出至少5.4的相对功效(RE)。

7.权利要求4-6的任一项的方法，其中所述抗体中和由具有选自0、I、III、IV、V、VI、VII、VIII、IX和XII的毒素型的艰难梭状芽孢杆菌菌株生产的毒素A和/或毒素B。

8.权利要求7的方法，其中：

毒素型0菌株具有选自001、002、012、014、020、014/020、014/020/077、106、018和053的PCR-核糖核酸型；

毒素型III菌株具有PCR-核糖核酸型027或075；

毒素型IV菌株具有PCR-核糖核酸型023；

毒素型V菌株具有选自078、079、122、126和078/126的PCR-核糖核酸型；

毒素型VI菌株具有PCR-核糖核酸型127或66-2；

毒素型VII菌株具有PCR-核糖核酸型66-2；

毒素型VIII菌株具有PCR-核糖核酸型017；

毒素型IX菌株具有PCR-核糖核酸型019；

毒素型XIa菌株具有PCR-核糖核酸型642；

毒素型XII菌株具有PCR-核糖核酸型056。

9.权利要求4-6的任一项的方法，其中所述抗体中和由具有PCR-核糖核酸型046或369的艰难梭状芽孢杆菌菌株生产的毒素A和/或毒素B。

10.权利要求7的方法，其中所述抗体中和由具有选自0、III、IV、V和VIII的毒素型的艰难梭状芽孢杆菌菌株生产的毒素A和/或毒素B。

11.权利要求7的方法，其中所述抗体中和由艰难梭状芽孢杆菌菌株毒素型0、III、IV、V和VIII生产的毒素A和/或毒素B。

12.权利要求10或11的方法，其中毒素型0菌株具有PCR-核糖核酸型012，毒素型III菌株具有PCR-核糖核酸型027，毒素型IV菌株具有PCR-核糖核酸型023，毒素型V菌株具有PCR-核糖核酸型078，和毒素型VIII菌株具有PCR-核糖核酸型017。

13.权利要求7的方法，其中所述抗体中和毒素型III、IV和V的艰难梭状芽孢杆菌菌株生产的毒素A和/或毒素B。

14.权利要求13的方法，其中毒素型III菌株具有PCR-核糖核酸型027，毒素型IV菌株具有PCR-核糖核酸型023，和毒素型V菌株具有PCR-核糖核酸型078。

15.一种针对表达艰难梭状芽孢杆菌二元毒素(CDT)的一种或多种艰难梭状芽孢杆菌菌株对宿主免疫和/或疫苗接种的方法，该方法包括给予宿主包含源自不表达CDT的艰难梭状芽孢杆菌菌株的灭活的纯化的艰难梭状芽孢杆菌毒素A和灭活的纯化的艰难梭状芽孢杆菌毒素B的组合物。