[发明专利]产生差向异构酶和苄基异喹啉生物碱的方法

权利要求书

1.一种使(S)-1-苄基异喹啉生物碱差向异构化为(R)-1-苄基异喹啉生物碱的方法，其包括：

使所述(S)-1-苄基异喹啉生物碱与至少一种酶接触，

其中使所述(S)-1-苄基异喹啉生物碱与所述至少一种酶接触将所述(S)-1-苄基异喹啉生物碱转化成(R)-1-苄基异喹啉生物碱。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少一种酶通过培养具有编码所述至少一种酶的编码序列的工程化的非植物细胞产生。

3.根据权利要求2所述的方法，其还包括：

向所述细胞培养物中添加(S)-1-苄基异喹啉生物碱。

4.根据权利要求3所述的方法，其还包括：

从所述细胞培养物中回收所述(R)-1-苄基异喹啉生物碱或其衍生物。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其中所述至少一种酶包括氧化酶。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述至少一种酶包括还原酶。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的方法，其中所述至少一种酶包括差向异构酶。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述差向异构酶包括选自由以下各项组成的组的氨基酸序列：SEQ ID NO：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14和15。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其中所述差向异构酶包括氧化酶结构域和还原酶结构域。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述氧化酶结构域为细胞色素P450氧化酶样结构域。

11.根据权利要求9所述的方法，其中所述还原酶结构域为可待因酮还原酶样结构域。

12.根据权利要求7-11中任一项所述的方法，其中所述工程化的非植物细胞为工程化的酵母细胞。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的方法，其中所述(S)-1-苄基异喹啉生物碱为(S)-牛心果碱。

14.根据权利要求1-13中任一项所述的方法，其中所述(R)-1-苄基异喹啉生物碱为(R)-牛心果碱。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其中通过以L-酪氨酸起始的代谢途径在所述工程化的非植物细胞内产生所述(S)-1-苄基异喹啉生物碱。