[发明专利]一种非细胞神经移植物的生物测定方法

权利要求书

1.一种用于进行包含神经内膜管支架的非细胞神经移植物的生物测定的方法，支架中的神经内膜管的内表面包括层粘连蛋白，其特征在于，所述方法包括：

将神经元或神经元组附着到非细胞神经移植物片段的第一端以形成测试结构；

在培养基中培养测试结构一段时间，以允许神经从神经元外生长到非细胞神经移植物片段中；

对所述测试结构进行分析，其中所述分析指示与外生长神经结构有关的数量，其中对所述测试结构进行分析包括：

识别至少三个最长的从神经元或神经元组外生长到非细胞神经移植物片段中的神经结构，

测量从神经元或神经元组附着到其上的非细胞神经移植物片段的第一端到非细胞神经移植物片段内的至少三个最长的神经结构每一个的末端的长度，

至少三个最长神经结构的测量长度求平均值；和

至少部分根据至少三个最长神经结构的测量长度的平均值来确定非细胞神经移植物的效力。

2.根据权利要求1所述的方法，其中执行所述测试结构的分析还包括：

制备用于切片的所述测试结构；

将所述测试结构分割成多个切片，其中所述多个切片中的每一个从垂直于所述第一端的所述非细胞神经移植物片段的一侧以预定距离纵向移除；

用一种或多种染色剂染色每个切片，以识别来自神经元或神经元组的外生长神经结构。

3.根据权利要求2所述的方法，其中制备用于切片的所述测试结构包括固定所述测试结构和石蜡包埋所述测试结构。

4.根据权利要求2所述的方法，其中所述一种或多种染色剂中的一种选自由βIII微管蛋白、PGP9.5和S100抗体组成的组。

5.根据权利要求1所述的方法，其中执行所述测试结构的分析还包括：

用扩散张量成像扫描全部或部分测试结构，并产生束成像图像，其中由束成像图像识别外生长神经结构；和

从束成像图像定量外生长神经结构的数量；和

其中确定非细胞神经移植物的效力还至少部分根据外生长神经结构的量化数量。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述神经元是背根神经节（DRG）外植体。

7.根据权利要求1所述的方法，其中进行所述测试结构的分析还包括测定以确定与所述外生长神经结构相关联的靶蛋白的量，以及

其中确定非细胞神经移植物的效力还至少部分根据与外生长神经结构相关的靶蛋白的确定数量。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述靶蛋白选自由βIII-微管蛋白、S100和GAP-43组成的组。

9.根据权利要求1所述的方法，其中所述外生长神经结构是神经突或许旺细胞。

10.根据权利要求1所述的方法，还包括在将所述神经元或神经元组附着到所述非细胞神经移植物片段之前钝化所述非细胞神经移植物片段。

11.根据权利要求1所述的方法，其中所述培养时间段为3天至7天。

12.根据权利要求1所述的方法，其中将所述神经元或神经元组附着到所述非细胞神经移植物片段包括使用胶原蛋白凝胶将所述神经元或神经元组固定到所述非细胞神经移植物片段。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述非细胞神经移植物片段取自非细胞的加工过的神经同种异体移植物。