[发明专利]鉴定护肤组合物的昼夜节律依赖性化妆剂的方法

说明书

皮肤是限定在生物体与环境之间的交互式边界的护盖的复杂的多层且动态的系统。它是身体最大的器官，并且对我们的健康和我们的自我形象至关重要。皮肤包括三个主要层：表皮、真皮和皮下脂肪层。表皮中的大部分细胞是产生称为角蛋白的蛋白质家族的角质细胞。表皮本身可以分成多层，其中最外层称为角质层，并且最内层称为基底层。所有的表皮细胞起源于基底层，并且随着它们逐渐向外置换到角质层而经历一个称为分化的过程，在此它们融合成鳞片并最终脱落。在健康的正常皮肤中，生产率与脱落率(脱屑率)大致相同。完全成熟的角质细胞起保护皮肤免受紫外线损坏的作用，并且有助于完成对环境刺激的免疫应答。

位于表皮正下方的真皮主要由蛋白质胶原构成，占真皮重量的75％，并且负责着皮肤的回弹性和弹性。胶原束通过贯穿真皮的弹性蛋白纤维保持在一起。成纤维细胞是在真皮中发现的主要细胞，其功能是合成胶原和真皮基底物质，真皮基底物质是缠住真皮的纤维和细胞组分的包含糖蛋白和糖胺聚糖的胞外基质。微小血管的网络贯穿真皮中的“钉突”，通过扩散将营养物、维生素和氧气带到表皮。

真皮下面是皮下组织，其包含从诸如肌肉和骨头的下面组织缓冲真皮的皮下脂肪。脂肪包含在包埋在结缔组织基质中的脂肪细胞中。该层还可容纳处于生长阶段的毛囊。

因此，皮肤是包含多种细胞类型和结构的多层复杂器官。皮肤老化同样是一个复杂的多因素过程，这是由未修复的细胞和组织损坏导致的功能能力受损而造成的。皮肤的老化过程是数十年来发生的内在因素和外在因素两者的结果。皮肤受到许多与其它器官相同的内在老化过程，但还暴露于太阳辐射、污染、香烟烟雾和可能促进皮肤过早老化或光老化的其它外在因素。通过鉴定与长寿和衰老相关联的细胞通路和基因，已经在理解衰老过程方面取得了重大进展。然而，就像一般的老化一样，尚未发展出对皮肤老化的综合理解。

皮肤研究人员将年龄诱导因素分为内在因素和外在因素，尽管这些因素是彼此相关的，例如通过外在因素可能加速内在老化的事实所反映。因素的复杂相互作用的一个示例涉及自由基，其是通过正常的代谢过程在内部产生，以及是由于包括UVR暴露的外部因素而生成。由于保护性内部抗氧化机制的年龄相关的下降，自由基可以在细胞中达到更高且持续的水平，并且改变皮肤中的蛋白质和DNA两者。改变的蛋白质和DNA的水平可能聚积，造成有时称为氧化应激反应的损坏。此外，继发于内部生成的自由基与由UVR和其它外部攻击(表面活性剂、过敏原和其它刺激物)生成的那些自由基的组合的损坏的持续聚积可以促进慢性炎性状态，这加速了老化过程。例如，可能生成蛋白分解酶，导致胶原降解。在一些情况下，由循环促炎介质(例如，前列腺素、细胞因子、组胺)升高产生的活化炎性细胞可以生成对核酸、细胞蛋白质和脂质引起氧化损坏的活性氧物质。由活性氧物质引起的聚积损坏可能刺激许多细胞因子级联，导致光老化和光致癌，所有这些都可能与老化皮肤的外观密切联系。

由氧化应激反应引起的变化可能会损害皮肤的弹性、紧致度和结构，促成塌陷和不规则的区域，最终表现为细纹、皱纹和质地问题。存在许多消费者可用的可商购获得的皮肤护理产品，它们涉及改善皮肤的健康和/或物理外观。许多此类产品涉及延缓、最小化或甚至消除通常与改善老化皮肤的外观相关联的变化。此类产品通常宣传使用一种或多种已知用于改善皮肤的健康和/或外观的化妆护肤剂。因此，仍然需要鉴定可以改善老化皮肤的外观的护肤活性物质。

由于与皮肤老化相关联的多细胞多因素过程，已经证明新型抗衰老化妆剂的成功鉴定是困难的。另外，许多期望的化妆剂可能包含具有可能未被充分理解的效果和相互作用的化合物的混合物。化妆品配制人员面临的另一挑战是化妆品必须对非处方消费者使用是安全的。对潜在化妆剂的生物学应答的常规体外研究包括在可以被鉴定出给出期望结果的化妆剂并将其移入下一测试阶段之前在各种细胞类型中筛检数百或甚至数千种潜在试剂。当采用筛检技术如连通映射或其它已知的基因应答分析技术时，该问题可能会进一步复杂化。这类研究可以被通常由化妆剂诱导和/或引起的复杂或弱可检测的基因应答所阻碍。这类弱应答部分地由于涉及到大量的基因和基因产物而产生，并且化妆剂可能以多种方式影响多个基因。此外，化妆剂的生物活性程度对于每个基因可能不同，并且难以定量。