[发明专利]肾病的病态生物标志物

说明书

技术领域

本发明涉及包括由粪便或肠道内容物基于D-型异构体和L-型异构体的氨基酸量计算出肾损伤的病态指标值的工序的分析方法、肾损伤的检查方法、以及输出关于肾损伤的病态信息的试样分析系统。

背景技术

肾脏是以通过从血液中过滤废旧物、多余的水分作为尿排出，从而维持体液的恒定性为主要作用的脏器。肾脏由于免疫系统异常、对药物的变态反应、高血压、糖尿病、出血和/或急剧血压下降、感染症、伴随烧伤的脱水等因素而受到损伤，导致肾功能下降。在由于肾损伤而肾功能下降到约60％以下时称为肾衰竭，根据肾功能下降的进展速度不同，大致分为急性肾衰竭(AKI)和慢性肾衰竭(CKD)。

急性肾衰竭(AKI)是指直到发病的时间为数小时至数周的肾衰竭。急性肾衰竭是由于缺血、药剂、内毒素休克等原因而肾功能急剧下降的状态，可发现体内代谢产物尿素氮、肌酸酐的血中浓度上升、电解质代谢异常和酸中毒等症状，一般根据血清肌酸酐值的急剧上升而诊断为急性肾衰竭。急性肾衰竭通过治疗可期待恢复，因此期望开发能够辨别更早期的急性肾衰竭的诊断标志物。然而，一般使用的血清中肌酸酐浓度根据年龄、性别、肌肉量和服用的药物等条件而变化，因此不能说是特异的诊断标志物(非专利文献1)，另外报告了中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、白介素-18(IL-18)、肾损伤分子(KIM-1)、肝型脂肪酸结合蛋白(FABPs)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C等蛋白质，和高香草酸硫酸盐、三甲胺N-氧化物等低分子代谢化合物等，但期待开发能更快更正确地检测病态的诊断标志物。

慢性肾衰竭(CKD)是指由于各种肾损伤而用肾小球滤过量表示的肾功能有所下降，或者提示肾脏损伤的表征慢性(3个月以上)地持续的肾衰竭。慢性肾衰竭是相当于日本成人人口的约13％的1330万人罹患的疾病，发展成晚期肾衰竭(ESKD)的风险高，威胁国民的健康。没有对慢性肾衰竭有效的治疗方法，如果慢性肾衰竭进展而肾功能继续下降则有尿毒症的危险，需要进行人工透析、肾移植，成为医疗经济上较大的负担(非专利文献2)。慢性肾衰竭由于病态在没有自觉症状的状态下进展，因此为了慢性肾衰竭的早期发现和进展抑制，需要利用肾衰竭的早期诊断标志物的诊断。但是，现在还不存在作为在比用肾小球滤过量表示的肾功能的变化发生更早的时期正确地反映肾损伤的进展的诊断标志物能够满足的标志物。

不仅急性肾衰竭、连慢性肾衰竭也没能获得早期诊断标志物的原因是，认为即使在肾脏受到损伤时，肾功能也能某种程度发挥，例如，直到肾脏受损30％左右为止，未受损伤的肾小球都能正常地工作，发挥充分的肾功能(即，从血液滤过废旧物、多余的水分的功能)。例如，排出到尿中的废旧物肌酸酐、尿素氮(BUN)是肾衰竭标志物之一，但直到肾功能某种程度丧失为止，都正常地排出到尿中，从而血中的肌酸酐值、BUN值不增加。近年开发的NGAL、KIM-1等是由炎症细胞表达的蛋白质，因而虽然可期待作为诊断标志物，但如上所述能够满足的标志物尚不存在。

一直以来被认为在哺乳类生物体内不存在的D-氨基酸，已经被表明在各种组织中存在，预测其承担某些生理功能。另外，已经显示血清中的D-氨基酸中D-丝氨酸、D-丙氨酸、D-脯氨酸、D-丝氨酸、D-谷氨酸、D-天冬氨酸的浓度能够作为肾衰竭的诊断标志物发挥功能(非专利文献3、非专利文献4、非专利文献5、非专利文献6)。进而公开了选自D-丝氨酸、D-苏氨酸、D-丙氨酸、D-天冬酰胺、D-别苏氨酸、D-谷氨酰胺、D-脯氨酸和D-苯丙氨酸中的1种或2种以上氨基酸能够作为肾病的病态指标值(专利文献1)，该文献中，作为用于试样的生物学材料列举了血液、血浆、尿等体液，粪便、汗、鼻涕等排泄物，体毛、指甲、皮肤组织、内脏组织等身体组织，但关于实际使用粪便中的D-型异构体的氨基酸作为诊断标志物没有任何显示。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2013/140785号

非专利文献

非专利文献1：Slocum,J.L.等，Transl Res.159:277(2012)

非专利文献2：KDIGO 2012 Clinical Practice Guideline for the Evaluation and Management of Chronic Kidney Disease,Kidney International Supplements 1(2013)

非专利文献3：Fukushima,T.等，Biol.Pharm.Bull.18:1130(1995)