[发明专利]使用融合蛋白对TCR重编程的组合物和方法

权利要求书

1.一种编码T细胞受体(TCR)融合蛋白(TFP)的分离的重组核酸分子，所述融合蛋白包含

(a)TCR亚基，所述TCR亚基由以下组成：

(i)TCR细胞外结构域，

(ii)TCR跨膜域，和

(iii)包含来自CD3ε的细胞内信号传导结构域的刺激性结构域的TCR细胞内结构域；及

(b)包含抗原结合结构域的鼠类、人或人源化抗体结构域；

其中所述抗体结构域可操作地连接至所述TCR亚基的N-末端；其中所述TFP当在T细胞中表达时并入TCR中；并且其中所述TCR细胞外结构域、所述TCR跨膜域和所述TCR细胞内信号传导结构域来自CD3ε。

2.一种编码T细胞受体(TCR)融合蛋白(TFP)的分离的重组核酸分子，所述融合蛋白包含

(a)TCR亚基，所述TCR亚基由以下组成：

(i)TCR细胞外结构域，

(ii)TCR跨膜域，和

(iii)包含来自CD3γ的细胞内信号传导结构域的刺激性结构域的TCR细胞内结构域；及

(b)包含抗原结合结构域的鼠类、人或人源化抗体结构域；

其中所述抗体结构域可操作地连接至所述TCR亚基的N-末端；并且其中所述TFP当在T细胞中表达时并入TCR中，并且其中所述TCR细胞外结构域、所述TCR跨膜域和所述TCR细胞内信号传导结构域来自CD3γ。

3.根据权利要求1或2所述的分离的重组核酸分子，其中所述抗原结合结构域是抗CD19结合结构域。

4.根据权利要求1或2所述的分离的重组核酸分子，其中所述抗原结合结构域是抗B细胞成熟抗原(BCMA)结合结构域。

5.根据权利要求1或2所述的分离的核酸分子，其中所述编码的抗原结合结构域通过连接子序列连接至所述TCR细胞外结构域。

6.根据权利要求5所述的分离的核酸分子，其中所述编码的连接子序列包括(G₄S)_n，其中n＝1至4。

7.根据权利要求1或2所述的分离的核酸分子，其中所述鼠类、人或人源化抗体结构域包括抗体片段。

8.根据权利要求1或2所述的分离的核酸分子，其中所述鼠类、人或人源化抗体结构域包括scFv或V_H结构域。

9.根据权利要求1所述的分离的核酸分子，所述核酸分子编码(i)分别具有SEQ ID NO:25、SEQ ID NO:27及SEQ ID NO:29的抗CD19轻链结合结构域氨基酸序列的轻链CDR1、轻链CDR2及轻链CDR3，和/或(ii)分别具有SEQ ID NO:31、SEQ ID NO:33及SEQ ID NO:35的抗CD19重链结合结构域氨基酸序列的重链CDR1、重链CDR2及重链CDR3。

10.根据权利要求9所述的分离的核酸分子，所述核酸分子编码轻链可变区，其中所述轻链可变区包含SEQ ID NO:49的氨基酸序列。

11.根据权利要求9所述的分离的核酸分子，所述核酸分子编码重链可变区，其中所述重链可变区包含SEQ ID NO:51的氨基酸序列。

12.根据权利要求1或2所述的分离的核酸分子，所述核酸分子编码(i)分别具有SEQ IDNO:37、SEQ ID NO:39及SEQ ID NO:41的抗BCMA轻链结合结构域氨基酸序列的轻链CDR1、轻链CDR2及轻链CDR3，和/或(ii)分别具有SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:45及SEQ ID NO:47的抗BCMA重链结合结构域氨基酸序列的重链CDR1、重链CDR2及重链CDR3。