[发明专利]含有从头结合结构域的多肽及其用途

权利要求书

1.用于结合目的靶的多肽，多肽包含：

氨基酸序列，其包含：

MGSWX₅EFX₈X₉RLX₁₂AIX₁₅X₁₆RLX₁₉ALGGSEAELAAFEKEIAAFESELQAYKGKGNPEVEX₅₅LRX₅₈X₅₉AAX₆₂IRX₆₅X₆₆LQAYRHN(SEQ ID NO:4)，

其中多肽源自对SEQ ID NO:1的氨基酸序列的修饰，

其中多肽特异性结合目的靶，

其中多肽与目的靶的特异性结合强于根据SEQ ID NO:1的多肽与目的靶的结合。

2.权利要求1的多肽，其中多肽不含SEQ ID NO:50。

3.权利要求1的多肽，其中对SEQ ID NO:1的修饰包含置换。

4.权利要求3的多肽，其中置换是保守置换。

5.权利要求3的多肽，其中置换是非保守置换。

6.权利要求3的多肽，其中置换不包括用半胱氨酸置换SEQ ID NO:1的氨基酸。

7.权利要求3的多肽，其中置换不包括用脯氨酸置换SEQ ID NO:1的氨基酸。

8.权利要求1的多肽，其中多肽特异性结合的目的靶是癌症抗原。

9.权利要求8的多肽，其中多肽特异性结合的癌症抗原是PD-L1。

10.权利要求9的多肽，其中多肽包含选自SEQ ID NO:38，SEQ ID NO:39，SEQ ID NO:40，SEQ ID NO:41，SEQ ID NO:42，SEQ ID NO:43和SEQ ID NO:44的氨基酸序列。

11.权利要求8的多肽，其中多肽特异性结合的癌症抗原是CD137，并且其中多肽包含选自SEQ ID NO:12，SEQ ID NO:13，SEQ ID NO:14，SEQ ID NO:15，SEQ ID NO:16，SEQ ID NO:17，SEQ ID NO:18和SEQ ID NO:19的氨基酸序列。

12.权利要求8的多肽，其中多肽特异性结合的癌症抗原是CD123。

13.权利要求12的多肽，其中多肽包含选自SEQ ID NO:92-127的氨基酸序列。

14.将参考多肽转化成具有与目的靶特异性结合的多肽的方法，该方法包括：

修饰来自参考多肽的多个氨基酸残基以产生多个候选结合多肽；

其中参考多肽包含非天然存在的多肽的变体并且包含由接头肽连接的三个反平行α螺旋，

其中待修饰的氨基酸残基是溶剂可及的或溶剂不可及的，

其中修饰包含氨基酸置换；

将多个候选结合多肽包装在多个载体中以产生候选文库；和

筛选候选文库以显示与目的靶特异性结合的候选结合多肽。

15.权利要求14的方法，其中置换是保守氨基酸置换。

16.权利要求14的方法，其中置换是非保守氨基酸置换。

17.根据权利要求14-16中任一项的方法，其中置换不包含半胱氨酸的置换。

18.根据权利要求14-17中任一项的方法，其中置换不包含脯氨酸的置换。

19.根据权利要求14-18中任一项的方法，方法还包括鉴定候选结合多肽中的潜在免疫原性氨基酸残基并修饰至少一个潜在免疫原性氨基酸残基，其中修饰包含氨基酸置换。

20.从头结合结构域多肽(DBDpp)，其中DBDpp包含三个反平行α螺旋并且是合成多肽的变体，其中DBDpp免疫特异性结合与CD123至少95％相同的蛋白质。

21.权利要求20的从头结合结构域多肽(DBDpp)，其中DBDpp具有约10^-4M至约10^-12M的解离常数(KD)。