[发明专利]用于快速测量生化需氧量的方法

权利要求书

1.一种用于通过荧光来测量样品的BOD5的标定方法，其基于被称为参考样品或标准溶液(Std1至Std8)的浓度增加的样品，所述参考样品由包含以下组分的相同储备溶液制备：

i)30mg/L至60mg/L的蛋白胨P1，

ii)20mg/L至50mg/L的包含最多400个氨基酸的约30kDa至50kDa的多肽P2，

iii)20mg/L至50mg/L的包含最多600个氨基酸的约50kDa至70kDa的多肽P3，

iv)5mg/L至25mg/L的包含15个至25个葡萄糖单元、有利地为15个葡萄糖单元的寡糖G1的混合物，

v)5mg/L至25mg/L的包含几百个至几万个葡萄糖单元的具有支链的多糖G2，

vi)130mg/L至170mg/L的具有直链的多糖G3，其包含几万个至几百万个葡萄糖单元且为纤维形式，

全部蛋白质占所述溶液中存在的全部有机物的35重量％至45重量％、有利地为40重量％，且全部糖占所述溶液中存在的全部有机物的55重量％至65重量％、有利地为60重量％。

2.一种用于快速测量含有可生物降解的有机物的样品中生化需氧量的方法，所述方法包括以下步骤：

a)在多孔微孔板内与荧光生物试剂和能够降解待测样品的微生物接种物一起温育：

-一方面，至少一个包含有机物的样品，以及

-另一方面，被称为参考样品(Std1至Std8)的浓度增加的8个样品，其由包含以下组分的相同储备溶液制备：

i)30mg/L至60mg/L的蛋白胨P1，

ii)20mg/L至50mg/L的包含最多400个氨基酸的约30kDa至50kDa的多肽P2，

iii)20mg/L至50mg/L的包含最多600个氨基酸的约50kDa至70kDa的多肽P3，

iv)5mg/L至25mg/L的包含15个至25个葡萄糖单元、有利地为15个葡萄糖单元的寡糖G1的混合物，

v)5mg/L至25mg/L的包含几百个至几万个葡萄糖单元的具有支链的多糖G2，

vi)130mg/L至170mg/L的具有直链的多糖G3，其包含几万个至几百万个葡萄糖单元且为纤维形式，

全部蛋白质占所述溶液中存在的全部有机物的35重量％至45重量％、有利地为40重量％，且全部糖占所述溶液中存在的全部有机物的55重量％至65重量％、有利地为60重量％，

-G1和P1在0小时至24小时的温育过程中被降解(区域1或Z1)，G2、P2和P3在24小时至48小时的温育过程中被降解(区域2或Z2)，G3在48小时内不被降解，根据降解区域Z1或Z2，所述参考样品或标准溶液使得能够根据参考样品的浓度来构建4条标定曲线；

b)分析由所述样品随时间变化发出的荧光，所述荧光分析包括3个步骤：

-在微生物接种物的作用下，测量待测样品和参考样品在45小时至50小时、有利地为48小时的降解中所发射的荧光强度，

-使用待测样品所测量的所述荧光强度，通过与参考样品所测量的荧光强度相比较来计算参考有机物的浓度，以及

-通过应用先前由比较根据相同方案对参考样品进行的荧光强度测量和根据BOD5标准对所述参考样品进行的测量而获得的对应模型，将该有机物的浓度转化成等同于BOD5标准(5天的生物需氧量)的mgO₂·L^-1值。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述参考样品Std1至Std8的可生物降解的有机物的浓度对应于0至约110mgO₂·L^-1的BOD值。

4.根据权利要求2或3中任一项所述的方法，其特征在于，所述温育是在pH 7.2的磷酸盐缓冲介质中、在25℃至35℃的温度下进行的。

5.根据权利要求2至4中任一项所述的方法，其特征在于，有机样品是净化装置废水，其选自未经净化的水、沉后水、经生物处理的水和排放物，地表水或地下水，来自工艺或工业生产的废水或废物。

6.一种用于实施根据权利要求2所述的方法的试剂盒，其特征在于，其包括：荧光生物试剂、参考样品和缓冲液。