[发明专利]分离和纯化降龙涎醚的方法

权利要求书

1.一种从包含化合物(II)、(III)和(IV)中的一种或多种的反应混合物中分离和纯化(-)-降龙涎醚的方法，

其中包括从包含化合物(II)、(III)或(IV)中的一种或多种的反应混合物中选择性地结晶(-)-降龙涎醚的步骤,由此使(-)-降龙涎醚从结晶溶剂中结晶，而化合物(II)、(III)和(IV)保持溶解在结晶溶剂中，其中所述结晶溶剂是乙醇或乙醇水混合物。

2.一种改善或增强(-)-降龙涎醚的气味的方法，其包括通过从包含权利要求1所述化合物(II)、(III)或(IV)中的一种或多种的反应混合物中选择性结晶(-)-降龙涎醚来选择性分离(-)-降龙涎醚的步骤，由此使(-)-降龙涎醚从结晶溶剂中结晶，而化合物(II)、(III)和(IV)保持溶解在结晶溶剂中，从而使得在分离后(-)-降龙涎醚不含或仅含有嗅觉可接受量的化合物(II)、(III)或(IV)，其中所述结晶溶剂是乙醇或乙醇水混合物。

3.权利要求1或2的方法，其中所述混合物不含或基本上不含高法呢醇。

4.权利要求1或2的方法，其中所述结晶溶剂是乙醇水混合物。

5.权利要求1或2的方法，其中所述反应混合物是采用酶催化环化含有7E,3E和7E,3Z高法呢醇几何异构体的混合物而反应形成的，其中在表达编码所述酶的基因的重组微生物存在的情况下进行所述反应，其中所述酶是氨基酸序列如SEQ ID NO 1、2或4所示的野生型角鲨烯-何帕烯环化酶或野生型角鲨烯-何帕烯环化酶变体。

6.权利要求5的方法，其中7E,3E和7E,3Z高法呢醇的所述混合物富含7E,3E几何异构体。

7.权利要求5的方法，其中7E,3E和7E,3Z高法呢醇的混合物由7E,3E和7E,3Z高法呢醇组成，并且没有高法呢醇的其它几何异构体。

8.权利要求5的方法，其中7E,3E异构体对7E,3Z异构体的重量比为至少80:20。

9.权利要求8的方法，其中7E,3E异构体对7E,3Z异构体的重量比为至少90:10。

10.权利要求8的方法，其中7E,3E异构体对7E,3Z异构体的重量比为至少95:5。