[发明专利]用于心脏再生的治疗性基因混合制剂

说明书

本揭示内容是关于一种选自FoxM1增强子、Id1增强子及JNK3抑制剂的活性药剂组合物，以及该活性药剂组合物于促进一有治疗需要的个体的心肌细胞增生及治疗一有治疗需要的个体的心脏疾病的用途。

本申请案依据35U.S.C.§119(e)主张于2015年4月20日提出的“A THERAPEUTICGENE COCKTAIL FOR HEART REGENERATION”美国临时申请案号62/149,854的优先权，其全文一并纳入以供参照。

背景技术

由于哺乳动物的成熟个体的心肌细胞(cardiomyocyte,CM)增生能力较差，因此心脏再生一直是此领域长期存在的挑战。CM于出生一周内会进行最后一次的DNA合成及有丝分裂，变为双核细胞后即不再进入细胞周期。虽然心脏受损后，残存的CM仍具有些许程度的增生能力，然而其增生效率极低(Naqvi et al.,Cell 157(4):795-807；2014)。

已知体细胞能被重整(reprogrammed)而回复到与具有高增生能力的胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)相似的多潜能细胞(pluripotent cell)状态(Takahashi etal.,Cell126(4):663-676；2006)。该些重整后的细胞一般称为诱导性多潜能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPS cell或iPSC)。相关领域亦已证实CM具有细胞重整的潜能。(Xu et al.,Cell Res.22(1):142-154)。此外，目前仍不了解不同时间点中CM重新进入细胞周期的详细机制或功能。

发明内容

本揭示内容是基于发明人意外地发现心肌细胞进行细胞重整的关键时间点，以及包含FoxM1、Id1及JNK3的基因组对于心肌细胞生长具有重要的影响。意外地，本揭示内容所述的基因组的增强子或抑制剂不仅可成功促进新生个体的心脏受损区域中心肌细胞的增生，亦能成功地促进成熟个体的心脏受损区域中心肌细胞的增生。具体来说，包含至少二种选自FoxM1增强子、Id1增强子及JNK3抑制剂的组合物，可成功达到此功效。

据此，本揭示内容提供了一种用以促进心脏再生或心脏细胞增生的方法；该方法包含对一有需要的个体投予一有效量的组合物，其中该组合物包含至少二种以下成分：(i)FoxM1增强子、(ii)Id1增强子及(iii)JNK3抑制剂。组合物可包含(i)及(ii)、(i)及(iii)、(ii)及(iii)。在某些实施例中，组合物可包含(i)–(iii)的所有成分。

在某些实施方式中，FoxM1增强子是一FoxM1多肽或一用以制备该FoxM1多肽的表达载体。在某些实施方式中，Id1增强子是一Id1多肽或一用以制备该Id1多肽的表达载体。或者是JNK3抑制剂是一对JNK3具有专一性的shRNA。

在任一种本揭示内容所述的方法中，投予步骤是指将一或多种用以制备FoxM1多肽、Id1多肽及对JNK3具有专一性的shRNA的表达载体传递至个体。在某些实施方式中，一或多种表达载体是病毒载体(例如腺病毒载体或腺病毒相关病毒载体)或非病毒载体。

能接受本揭示内容所述方法治疗的个体可以是一罹患心肌梗塞、疑似罹患心肌梗塞或有罹患心肌梗塞的风险的人类病患。在某些实施例中，是将该组合物投予至一发生或疑似发生心脏退化性疾病的位置。在某些实施例中，该个体是一新生个体。在某些实施例中，该个体是一成熟个体。

在另一方面，本揭示内容提供了一种用以促进心脏再生的试剂盒，该试剂盒包含至少二种以下成分：(i)本揭示内容所述的FoxM1增强子；(ii)本揭示内容所述的Id1增强子；以及(iii)本揭示内容所述的JNK3抑制剂。试剂盒可以包含(i)到(iii)的任何组合；举例来说，(i)–(iii)所有成分。在某些实施例中，试剂盒包含用以制备FoxM1多肽、Id1多肽及/或对JNK3具有专一性的shRNA的表达载体。表达载体可以是病毒载体(例如腺病毒载体或腺病毒相关病毒载体)或非病毒载体。