[发明专利]核酸产品及其施用方法

权利要求书

1.一种用于在哺乳动物受试者的细胞群中表达目标蛋白质的方法，其包括：向所述哺乳动物受试者施用包含有效剂量的编码所述目标蛋白质的RNA的组合物，所述RNA含有避免显著细胞毒性的非典型核苷酸的组合，其中：

所述有效剂量为约100ng至约2000ng，并且

所述组合物在皮内施用。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述目标蛋白质为白介素，任选地选自IL2、IL15、IL16和IL22，或其变体或突变体。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述目标蛋白质选自LIF、FGF1、FGF9、FGF15、FGF19、FGF21、FGF23、BDNF、丝氨酸蛋白酶抑制剂B1、半胱天冬酶-1、BMP2和BMP6。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述非典型核苷酸在选自嘧啶的2C位置、4C位置和5C位置、或选自嘌呤的6C位置、7N位置和8C位置的位置处具有一个或多个取代。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述非典型核苷酸任选地以占所述非典型核苷酸至少50％、或至少60％、或至少70％、或至少80％、或至少90％、或100％的量包括下列中的一者或多者：5-羟基胞苷、5-甲基胞苷、5-羟甲基胞苷、5-羧基胞苷、5-甲酰基胞苷、5-甲氧基胞苷、假尿苷、5-羟基尿苷、5-甲基尿苷、5-羟甲基尿苷、5-羧基尿苷、5-甲酰基尿苷、5-甲氧基尿苷、5-羟基假尿苷、5-甲基假尿苷、5-羟甲基假尿苷、5-羧基假尿苷、5-甲酰基假尿苷和5-甲氧基假尿苷。

6.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中至少约50％的胞苷残基为非典型核苷酸，并且其选自5-羟基胞苷、5-甲基胞苷、5-羟甲基胞苷、5-羧基胞苷、5-甲酰基胞苷和5-甲氧基胞苷。

7.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中至少约75％或至少约90％的胞苷残基为非典型核苷酸，并且所述非典型核苷酸选自5-羟基胞苷、5-甲基胞苷、5-羟甲基胞苷、5-羧基胞苷、5-甲酰基胞苷和5-甲氧基胞苷。

8.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中至少约20％的尿苷，或者至少约40％、或至少约50％、或至少约75％、或至少约90％的尿苷残基为非典型核苷酸，并且所述非典型核苷酸选自假尿苷、5-羟基尿苷、5-甲基尿苷、5-羟甲基尿苷、5-羧基尿苷、5-甲酰基尿苷、5-甲氧基尿苷、5-羟基假尿苷、5-甲基假尿苷、5-羟甲基假尿苷、5-羧基假尿苷、5-甲酰基假尿苷和5-甲氧基假尿苷。

9.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中至少约40％、或至少约50％、或至少约75％、或至少约90％的尿苷残基为非典型核苷酸，并且所述非典型核苷酸选自假尿苷、5-羟基尿苷、5-甲基尿苷、5-羟甲基尿苷、5-羧基尿苷、5-甲酰基尿苷、5-甲氧基尿苷、5-羟基假尿苷、5-甲基假尿苷、5-羟甲基假尿苷、5-羧基假尿苷、5-甲酰基假尿苷和5-甲氧基假尿苷。

10.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中至少约10％的鸟嘌呤残基为非典型核苷酸，并且所述非典型核苷酸任选地为7-脱氮鸟苷。

11.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述RNA含有不超过约50％的代替鸟苷残基的7-脱氮鸟苷。

12.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述RNA不含有代替腺苷残基的非典型核苷酸。

13.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述RNA包含5’帽结构。

14.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述RNA5’-UTR包含Kozak共有序列。