[发明专利]选择治疗性分子的方法

说明书

本公开内容提供采用钙波动测定法和/或序列评分计算鉴定对于给药是安全的分子的方法。本公开内容还包括采用钙波动测定法、序列评分方法、体内耐受性测定法或其任何组合选择或鉴定具有可耐受的体内神经毒性的分子的方法。

早期申请的引用

本申请是要求2015年2月4日提交的美国临时申请号62/112,058、2015年5月4日提交的美国临时申请号62/156,684和2016年1月15日提交的美国临时申请号62/279,610的权益的PCT申请，其所有通过引用以其整体结合到本文中。

通过EFS-WEB电子提交的序列表的引用

本申请中提交的电子提交序列表(名称：3338.035PC03 SL.txt，大小：339,610字节；创建日期：2016年2月4日)的内容通过引用以其整体结合到本文中。

发明领域

本发明涉及用于选择毒副作用降低的治疗性分子的方法。所述方法可在给予实验室动物之前在体外或在计算机上使用以筛选分子，或所述方法可体内用于实验室动物。

发明背景

在特异性靶向治疗学领域中，一些治疗性分子例如通过与蛋白质的非特异性相互作用、刺激不需要的免疫应答或在组织中蓄积而引起毒副作用。当将治疗性分子给予受试者时，一个重大顾虑是分子的潜在神经毒性。暴露于神经毒性分子可导致脑和外周神经系统损伤，造成长期的生理问题。因此，当给予时，治疗性分子不仅仅在治疗需要的疾病或病症中有效，而且还有可接受的毒性(例如神经毒性)是重要的。

最有效的治疗性分子的确定通常包括合成大量经设计靶向细胞中的某一因子的分子并针对活性和毒性测试该大量的分子。虽然可进行动物研究以测定毒性，但进行动物研究(其中由于待测试的大量分子具有有毒性质所致，大量动物死亡)在伦理上或经济上都不可取。因此，需要测定治疗性分子的毒性(例如神经毒性)而不需要动物试验的改进方法。

发明概述

本公开内容提供测试或测定分子的体内急性神经毒性的方法，所述方法包括在与分子接触的神经元细胞中体外测量胞内游离钙浓度的波动(“钙波动”)。

本公开内容还提供用于选择具有可耐受的体内急性神经毒性的分子的方法，所述方法包括体外测量与分子接触的体外神经元细胞中的钙波动，其中所述分子显示与对照相当的钙波动水平。

涉及测量钙波动的本公开内容的上述方法可进一步包括计算分子(例如包含核苷酸序列的多核苷酸)的序列评分，其中序列评分通过下式(I)计算：

(核苷酸序列中C核苷酸或其类似物的数目 - 核苷酸序列中G核苷酸或其类似物的数目)/核苷酸序列的总核苷酸长度 (I)。

本发明还提供测定包含核苷酸序列的分子的体内急性神经毒性的方法，所述方法包括计算序列评分，其中序列评分通过下式(I)计算：

(核苷酸序列中C核苷酸或其类似物的数目 - 核苷酸序列中G核苷酸或其类似物的数目)/核苷酸序列的总核苷酸长度 (I)。

本发明还提供选择包含具有可耐受的体内急性神经毒性的核苷酸序列的分子的方法，所述方法包括应用下式(I)计算序列评分：

(核苷酸序列中C核苷酸或其类似物的数目 - 核苷酸序列中G核苷酸或其类似物的数目)/核苷酸序列的总核苷酸长度 (I)，

其中核苷酸序列具有大于或等于0.2的序列评分。