[发明专利]免疫检测方法和用于其的测试条

说明书

问题是提供在使用免疫层析的检测方法中抑制粪便特有的非特异性反应的方法以及用于该方法的免疫层析测试条，所述免疫层析在不溶性膜中展开粪便样品从而检测样品中的分析物。本发明提供在抗‑IgA抗体的存在下进行免疫层析反应从而检测粪便样品中的分析物而不受非特异性反应影响的方法，以及用于该方法的免疫层析测试条。

技术领域

本发明涉及在由粪便样品(源自粪便的样品)引起的免疫反应中非特异性反应的抑制剂，以及使用该抑制剂的非特异性反应抑制方法和免疫检测方法。

特别地，本发明涉及在使用免疫层析的免疫反应中非特异性反应的抑制剂，以及使用该抑制剂的非特异性反应抑制方法、检测方法和免疫层析测试条。

背景技术

免疫检测方法得到广泛使用，因为能够以高特异性和灵敏度实现检测。特别地，使用免疫层析的检测方法由于便捷性得到广泛使用。进行检测的样品的实例包括尿、粪便、唾液、血、血浆等，其适于用作临床测试样品并广泛用作可用于诊断的样品。

为了通过使用免疫层析检测包含在这些样品中的分析物，必须消除包含在样品中的多种检测干扰物质。干扰物质包括直接干扰经免疫层析的样品展开的物质，即引起用于展开的不溶性膜阻塞的物质，以及尽管在缺少反应物时仍显示颜色反应的物质，即引起所谓的非特异性反应的物质。

总的来说，为了消除在不溶性膜中引起阻塞的物质，本领域已知分离该物质的功能分配给样品垫，并且如果全血用作样品，则血分离膜置于样品添加部的下游从而移除血细胞。然而，虽然各种原因是可能的，但这些非特异性反应的原因并不明确，因此目前没有确定对策。

通常已知明胶、酪蛋白、牛血清白蛋白、合成聚合物等是用于在抗原-抗体反应中阻断该非特异性反应的试剂，且已知允许这些物质共存于使用免疫层析的反应系统的方法(专利文件1和2)。

虽然如上所描述的已知用于消除非特异性反应的影响的多种方法，但是方法对由粪便样品引起的非特异性反应的抑制是否起作用是未知的。

专利文件3描述了在使用粪便作为样本的情况下的问题，使用粪便作为样本的方法(诸如ELISA)具有低检测灵敏度，且常常引起非特异性反应，这使得难以判定结果。专利文件3公开了在通过使用免疫层析检测诺如(norovirus)病毒或札幌病毒时通过使用pH9.0至10.0的样本稀释液抑制非特异性反应的方法，从而解决该问题。但是该方法在处理方面有问题，因为使稀释液成为碱性是必须的，这对于样本稀释液并不常见。

引用列表

专利文献

专利文件1：日本公开专利公开号2003-344406。

专利文件2：日本公开专利公开号2002-148266。

专利文件3：日本公开专利公开号2004-301684。

发明概述

技术问题

本发明所要解决的问题是提供非特异性反应的抑制剂，其抑制在免疫检测粪便样品中的分析物的方法中粪便特有的非特异性反应，以及提供使用该抑制剂的非特异性反应抑制方法和免疫检测方法。

特别地，问题是在使用在不溶性膜中展开粪便样品从而检测样品中的分析物的免疫层析的方法中提供非特异性反应抑制剂、非特异性反应-抑制方法、免疫检测方法和免疫层析测试条。

问题的解决方案

虽然免疫检测粪便样品中的分析物时至今通常使用的封闭剂对特定比例的样品起作用，但是本发明人已发现在样品(即粪便样品)中存在独特的非特异性反应的引发物质，其中非特异性反应未被任何封闭剂所抑制。