[发明专利]多重载体系统及其应用

权利要求书

1.在细胞中表达感兴趣的基因的编码序列的载体系统，所述编码序列包含第一部分和第二部分，所述载体系统包含：

c)第一载体，其包含：

-所述编码序列的所述第一部分(CDS1)，

-第一重建序列；和

d)第二载体，其包含：

-所述编码序列的所述第二部分(CDS2)，

-第二重建序列，

其中，所述第一和第二重建序列选自下组：

i]第一重建序列由所述编码序列的所述第一部分的3'端组成，且第二重建序列由所述编码序列的所述第二部分的5'端组成，所述第一和第二重建序列是重叠序列；或

ii]第一重建序列包含剪接供体信号(SD)，且第二重建序列包含剪接受体信号(SA)，任选地，第一和第二重建序列各自之一还包含重组引发性序列，

其特征在于，第一和第二载体之一或两者还包含降解信号的核苷酸序列，所述序列在i)的情况中位于CDS1的3'端和/或CDS2的5'端，而在ii)的情况中位于相对于SD的3'位置中和/或相对于SA的5'位置中。

2.如权利要求1所述的载体系统，其中，第一和第二载体均还包含所述降解信号的核苷酸序列，其中，第一载体中的降解信号的核苷酸序列与第二载体中的降解信号的核苷酸序列相同或不同。

3.如权利要求1或2中任一项载体系统，其中，第一重建序列在相对于所述SD的3'位置中包含剪接供体信号(SD)和重组引发性区域，第二重建序列在相对于所述SA的5'位置中包含剪接受体信号(SA)和重组引发性序列；其中所述降解信号的核苷酸序列位于第一和第二载体之一或两者的重组引发性区域的核苷酸序列的5'端和/或3'端处。

4.如前述权利要求中任一项所述的载体系统，其中，所述降解信号的核苷酸序列选自：一种或多种蛋白质泛素化信号、一种或多种微小RNA靶序列，和/或一种或多种人工终止密码子。

5.如前述权利要求中任一项所述的载体系统，其中，所述降解信号的核苷酸序列包含或由如下部分组成：编码选自CL1SEQ ID No.1、CL2SEQ ID No.2、CL6SEQ ID No.3、CL9SEQ ID No.4、CL10SEQ ID No.5、CL11SEQ ID No.6、CL12SEQ ID No.7、CL15SEQ ID No.8、CL16SEQ ID No.9、SL17SEQ ID No.10，或PB29(SEQ ID No.14或SEQ ID No.15)的序列的序列；或者，其中所述降解信号的核苷酸序列包含或由如下部分组成：选自miR-204SEQ ID No.11、miR-124SEQ ID No.12或miR-26a SEQ ID No.13的序列。

6.如前述权利要求中任一项所述的载体系统，其中，第一载体的降解信号的核苷酸序列包含或由如下部分组成：编码CL1SEQ ID No.1的序列，或包含或由如下部分组成：SEQ ID No.16，或包含或由如下部分组成：miR-204SEQ ID No.11和miR-124SEQ ID No.12，优选包含三个拷贝的miR 204SEQ ID No.11和三个拷贝的miR 124SEQ ID No.12，或包含或由如下部分组成：miR-26a SEQ ID No.13，优选包含四个拷贝的miR-26a SEQ ID No.13。

7.如前述权利要求中任一项所述的载体系统，其中，第二载体的降解信号的核苷酸序列包含或由如下部分组成：编码PB29(SEQ ID No.14或SEQ ID No.15)的序列，或包含或由如下部分组成：SEQ ID No.19或SEQ ID No.20，优选第二载体的降解信号包含或由如下部分组成：编码三个拷贝的SEQ ID No.14或SEQ ID No.15的PB29的序列。

8.如前述权利要求中任一项所述的载体系统，其中，第一载体还包含操作性地连接至所述编码序列的所述第一部分(CDS1)的5'端部分的启动子序列。