[发明专利]应用颗石类微藻卡氏侧金藻生产聚不饱和脂肪酸的方法

说明书

本发明公开利用颗石类微藻卡氏侧金藻(Pleurochrysis carterae)生产聚不饱和脂肪酸的方法。本发明提供了利用卡氏侧金藻(Pleurochrysis carterae)(Haptophyta,Prymnesiophyceae)产生二十碳五烯酸(EPA,20:5n‑3)、二十二碳六烯酸(DHA,22:6n‑3)、十八碳四烯酸(SDA,18:4n‑3)、α‑亚麻酸(ALA,18:3n‑3)、和油酸(18:1)的方法。本发明包含下列内容：(a).用于诱导该藻种合成积累聚不饱和脂肪酸的培养条件；(b).一种增强该藻种合成积累油酸的方法。运用本发明描述的方法所生产的聚不饱和脂肪酸可以应用于食品、营养补充剂、化妆品和药品等领域。

背景技术

颗石类微藻是一类广泛存在于温带和热带海洋的单细胞浮游生物。颗石类海洋藻华是海洋藻华的常见类型，其在1978到1986年间的年均面积达到140万平方公里(Brownand Yoder,1994)，而其中的主要藻种为Emiliania huxleyi和Gephyrocapsa oceanica(Hulburt et al.,1960)。由于其分布广泛并具有独特的生理学特征，颗石类微藻对海洋生态系统和全球碳循环具有重要的影响。作为光合生物，颗石类微藻不仅能够通过光合作用利用二氧化碳而合成积累蛋白质、脂类、和其它各类有机化合物，它们还可以利用二氧化碳通过钙化作用而合成碳酸钙晶体，因而实现将二氧化碳长期封存的目的(Brownlee andTaylor,2004；Rost and Riebesell,2004)。除此之外，颗石类微藻还具有其它潜在的应用前景，例如：颗石类微藻细胞能够合成积累各种脂类，这些脂类可以用于生产生物柴油或者聚不饱和脂肪酸(Fernandez et al.,1994；Riebesell et al.,2000；Moheimani andBorowitzka,2006)。另外，Takenaka等研究者显示，颗石类微藻可以作为钙补充剂而用于人类营养补充剂(Takenaka et al.,1996a,1996b)。

对于颗石藻类的研究已有较长的历史，但是多集中于对其生活周期和细胞形态(Jeffrey et al.,1988；Green et al.,1996；Kazuko et al.,2006,2011)、光合作用与钙化作用(Balch et al.,1992；Buitenhuis et al.,1999)、以及其对海洋生态系统的影响(Feely et al.,2004；Fabry,2008；Iglesias-Rodriguez et al.,2008)等方面的研究。但是，很少有涉及所述藻种的脂肪酸成分的研究。本发明公开了诱导卡氏侧金藻(Pleurochrysis carterae)合成积累聚不饱和脂肪酸的培养条件，同时也展示了光照强度、温度和二苯胺浓度对于卡氏侧金藻(Pleurochrysis carterae)合成积累脂肪酸的影响。

发明内容

本发明描述了颗石类微藻卡氏侧金藻(Pleurochrysis carterae)(Haptophyta,Prymnesiophyceae)的细胞以及优化所述藻种的细胞合成积累聚不饱和脂肪酸的方法。

本发明进一步描述了用于优化颗石类微藻卡氏侧金藻(Pleurochrysiscarterae)的细胞合成积累脂肪酸的培养基和培养条件。

本发明-进一步描述了使用二苯胺诱导颗石类微藻卡氏侧金藻(Pleurochrysiscarterae)的细胞合成积累油酸的方法。

具体实施方式

1).用于诱导所述藻种合成积累聚不饱和脂肪酸的培养基成分

用于诱导所述藻种合成积累聚不饱和脂肪酸的培养基包括以下培养基之一：

诱导所述藻种合成积累聚不饱和脂肪酸可以在下列培养装置中使用上述培养基而实现：

1a.在含有上述培养基和0.5％-5％的琼脂胶平板中；