[发明专利]衣原体激活的B细胞平台及其方法

说明书

相关专利申请的交叉引用

本申请要求提交于2015年2月10日的美国临时申请No.62/114,349和提交于2015年10月29日的美国临时申请No.62/247,827的权益，这两篇申请全文以引用方式并入本文中。

背景技术

树突状细胞(DC)被认为是有效的抗原呈递细胞(APC)，并且是对感染性疾病和癌症的保护性免疫的有效诱导物。这些引发了对使用DC作为细胞疫苗，尤其是分化形成外周血单核细胞的DC的强烈兴趣。然而，使用DC的临床试验所表现的总体临床反应率非常低，从而强调了需要改进基于DC的疫苗。这些细胞疗法成功的具体限制是可以从单核细胞产生的DC数目有限，因为DC不能离体扩增，从而使得其难以产生大量的这些细胞来用于长期、多重施用方案。此外，DC在冷冻保存后引发免疫应答的能力具有显著程度的变化性。这些限制变得尤其重要，因为更大的DC数量和治疗已经表现为引发更强健的抗肿瘤免疫并且改善临床反应。

B细胞代表大量有效的APC，并且可能是替代DC、可以离体产生用于免疫治疗目的的唯一自体同源APC。虽然B细胞已经被描述为诱导T细胞耐受或甚至阻断体内抗肿瘤免疫应答，但是这些报道仅限于缺乏重要辅助和共刺激分子表达的静息B细胞。另一方面，B细胞可以由表达CD40L的细胞以及细胞因子或Toll样受体(TLR)配体的组合激活成为有效的APC，然而这些方法并未诱导最佳的B细胞激活(TLR配体)或需要使用细胞系(CD40L)，并且这些限制使它们不适用于临床应用。

激活的B细胞具有增强的MHC和共刺激分子表达，并且表现出极大改善的抗原呈递能力以完全激活初始和记忆T细胞。同样重要的是，激活的B细胞可以通过分泌趋化因子来募集T细胞并且迁移到次级淋巴器官；这是体内诱导有效抗肿瘤免疫应答的关键要求。因为B细胞可以容易地离体获得，所以它们代表了用于免疫治疗应用的自体同源APC的有吸引力的来源。此外，激活的B细胞表达I类和II类MHC，因此与广泛的抗原一起使用。因此，在本领域中需要诱导B细胞的激活和增殖的实用方法来提供靶向多种类型的肿瘤和感染性疾病的细胞疫苗。

发明内容

本文公开了一种用于产生激活的抗原呈递细胞(APC)的平台，其中该平台包括：a)衣原体(Chlamydia)属(包括沙眼衣原体(C.trachomatis)、鹦鹉热衣原体(C.psittaci)和鼠型衣原体(C.muridarum))，或激活蛋白、肽或其片段；b)B细胞群；以及c)抗原，其中该抗原不是来源于衣原体属(包括沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体和鼠型衣原体)或者不是来源于蛋白、肽或其片段。

还公开了一种用于在受试者中产生激活的、抗原呈递衣原体激活的B细胞的方法，该方法包括：a)从受试者获得B细胞；b)将来自步骤a)的B细胞暴露于衣原体属(包括沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体和鼠型衣原体)或蛋白、肽或其片段；c)将步骤b)的B细胞暴露于所需的抗原，其中该抗原不是来源于衣原体属(包括沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体和鼠型衣原体)或者不是来源于激活蛋白、肽或其片段，从而获得激活的、抗原呈递衣原体激活的B细胞(CAB)。

还公开了一种治疗有需要的受试者的方法，该方法包括：a)从受试者获得B细胞；b)将来自步骤a)的B细胞暴露于衣原体属(包括沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体和鼠型衣原体)或激活蛋白、肽或其片段；c)将步骤b)的B细胞暴露于抗原，其中该抗原不是来源于衣原体属(包括沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体和鼠型衣原体)或者不是来源于蛋白、肽或其片段，从而获得激活的、抗原呈递衣原体激活的B细胞(CAB)；以及d)用步骤c)的激活的、抗原呈递衣原体激活的B细胞治疗受试者。

在附图和下面的描述中阐述了本发明的一个或多个实施方案的细节。本发明的其他特征、目的和优点将根据说明书和附图以及权利要求书而变得显而易见。

附图说明

图1示出了沙眼衣原体激活小鼠、恒河猴和人B细胞的示意图。CAB还已经在狗和猫中产生。

图2示出了描绘用于证明CAB能够交叉致敏(cross-prime)可溶性抗原并激活抗原特异性CD8+T细胞的实验设计的示意图。转基因OT-I小鼠的T细胞受体(TCR)特异于卵清蛋白(OVA)，并且这些细胞是从脾脏获取的，标记有用于确定细胞增殖的荧光标记物，然后在用负载有OVA的CAB治疗野生型小鼠的前1天转移到野生型小鼠中。三天后通过流式细胞术测定OT-I细胞的增殖。

图3示出CAB能够以剂量依赖性方式在体内交叉致敏抗原特异性CD8+T细胞。