[实用新型]一种采用静电层层自组装技术修饰的生物工程猪角膜

说明书

技术领域

本实用新型涉及医疗领域，尤其是静电层层自组装技术修饰的生物工程猪角膜。

背景技术

角膜是眼球前壁主要起屈光和屏障作用的一层透明组织。多种因素如退行性改变，营养不良，感染，炎症，损伤，眼内其他疾病累及等都可导致角膜疾病甚至失明。目前角膜病是仅次于白内障，排名第二的致盲眼病。异体角膜移植即人角膜移植目前仍然是因角膜疾病而失明患者的首选治疗方式。目前的手术方式有角膜穿透性移植，板层角膜移植，内皮细胞角膜移植等等。然而供体组织缺乏，移植物排异、失败，视力恢复可变性大等问题一定程度上限制了角膜移植手术的应用。

人工角膜适用于缺乏合适的供体而亟需替换病变角膜或者无法进行角膜移植的严重角膜疾病患者。虽然光学性能稳定，但生物相容性欠佳，术后并发症(植入物漏出/排斥，青光眼，视网膜脱离等)发生率高，细胞无法粘附，容易感染等缺点限制了人工角膜的应用。

生物工程角膜应运而生，具有生物相容性好，稳定性好，利于细胞粘附、长入、增殖等优点。生物工程角膜中最大程度保留角膜天然结构和成分的是角膜脱细胞基质，目前在国内已有上市产品——艾欣瞳，在前期临床研究中获得了不错的效果，目前已经投入临床应用，极大的帮助了缺乏角膜供体的角膜盲患者。然而，单纯角膜脱细胞基质的使用有一定限制，如严重感染，外伤、化学烧伤等损伤严重情况下自身角膜缘干细胞缺乏，严重排斥反应等情况下，受体角膜失代偿，角膜溶解等，植入的生物工程角膜无法成功存活并重建眼表。 角膜脱细胞基质在移植前的修饰、表面改性可以复合生物活性趋化因子、生长因子等在局部创造一个合适的微环境，诱导、激发供体自身细胞参与修复过程，提高植片的存活和移植后效果。

目前生物工程角膜的制备有多种方法，包括Triton-X100(聚乙二醇辛基苯基醚)、EDTA(乙二胺四乙酸)、SDS(十二烷基磺酸钠)、胰酶、DNA/RNA酶，虽能获得免疫原性和细胞残留低的脱细胞角膜支架，但反应剧烈，对角膜组织破坏性大，面临蛋白变性、GAG(糖氨聚糖)含量降低等问题。中国专利200710027698.6“一种脱细胞角膜基质及其制备方法”利用表面活性剂SDS(十二烷基磺酸钠)、Triton-X100(聚乙二醇辛基苯基醚)通过化学渗透法获得去细胞的角膜基质，基质内活性蛋白部分丢失。中国专利201410264542X“一种脱细胞角膜基质及其制备方法”通过脱细胞试剂和水交替使用改变组织渗透压的方法去除免疫原成分和可溶性蛋白，反复脱水对组织形态影响较大。

实用新型内容

本实用新型所要解决的技术问题是提供一种静电层层自组装修饰的生物工程猪角膜，所提供的生物工程角膜具有促进角膜移植后角膜缘干细胞、角膜上皮细胞迁移，提高植片的存活率，加速植片与宿主角膜的融合，加速眼表重建，促进视功能恢复的特点。

本实用新型提供的技术方案是：一种采用静电层层自组装技术修饰的生物工程猪角膜，其特征在于：该生物工程猪角膜的表面由内而外依次反复沉积有聚阳离子层、透明质酸层及细胞趋化因子层，最外层为细胞趋化因子层。

所述聚阳离子层厚度为0.5-5nm，透明质酸层厚度为0.5-10nm，细胞趋化因子层厚度为1-10nm。

所述聚阳离子为壳聚糖或聚赖氨酸。

本实用新型的有益效果是：利用静电层层自组装技术在生物工程猪角膜表面构建带有趋化因子SDF-1α的透明生物膜，能够促进宿主角膜缘干细胞和角膜上皮细胞的迁移，从而在生物工程角膜形成上皮细胞层，提高植片的存活率，加速植片与宿主角膜的融合，加速眼表重建，促进视功能恢复。

采用静电层层自组装方法修饰生物工程猪角膜，简单易行无污染，具有足够的生物稳定性，制备条件温和，并且组装过程采用的均为天然聚电解质或者生物分子，无细胞毒性无免疫原性；因而制成的生物工程角膜对眼内其他组织无毒副作用，拥有良好的生物相容性。该方法制造出的生物工程角膜透光性理想，生物相容性良好，可达到提高生物工程角膜移植的成功率及术后视功能恢复的目的，并使众多角膜病患者增强对抗病理环境的能力，提高角膜移植成功的概率，取得理想的视功能。

附图说明

图1是静电层层自组装过程示意图。

图2是趋化因子对角膜上皮细胞迁移能力的影响(transwell体系)。

图中：为聚阳离子；为透明质酸；为细胞趋化因子；为脱细胞角膜支架。

具体实施方式