[实用新型]适用于形态学观察和功能研究的组织灌流槽有效

专利信息
申请号: 201620059151.9 申请日: 2016-01-21
公开(公告)号: CN205313526U 公开(公告)日: 2016-06-15
发明(设计)人: 陈鹏慧 申请(专利权)人: 中国人民解放军第三军医大学
主分类号: C12M1/00 分类号: C12M1/00
代理公司: 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 代理人: 赵荣之
地址: 400038 重*** 国省代码: 重庆;85
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摘要:
搜索关键词: 适用于 形态学 观察 功能 研究 组织 灌流
【说明书】:

技术领域

实用新型涉及生物医学技术的应用,主要针对神经科学和活体组织的电生理学研究领 域,用于对活体脑组织切片、心肌片和平滑肌的整铺片进行持续恒定灌流相应细胞外液,以保 持组织连接的完整性和细胞活性,实现对组织片中细胞代谢、分泌活动及电生理学功能研究的 实验装置。

背景技术

在现代医学生物学尤其是神经科学研究中,活体组织切片的体外培养和观察技术是非常重 要和广泛应用的实验技术之一。近年来发展起来的组织培养技术目的是使组织标本离开体内而 生存,给培养技术提出了更高的要求。很多学者在培养操作的方法、培养组织的器皿和培养基 等方面做了改进和尝试,使体外组织培养的技术更趋于完善,细胞生长活性得到提高。活体组 织切片可应用的研究方法有:

脑片标记,使突触摄入放射性标记神经递质或前体,然后神经脑片摄入,使神经末梢递质 贮存库被选择性标记。一般需要在37℃孵育30-60min,然后用灌流液冲洗脑片,将脑片移入 小室中灌流。

脑片杂交,经振动切片后的活体脑片,应用预先加温至37℃的含有生物素或其他标记分 子的孵育液,持续作用30分钟。然后用37℃正常细胞外液清洗脑片。此过程均需要在维持脑 片活性状态下进行。

心肌片电生理实验,需要保持基本完整的心肌细胞之间缝隙连接,观察新植入的心肌细胞 和宿主细胞之间功能联系。可应用膜片钳技术或激光共聚焦扫描显微镜技术。

组织工程化心肌组织在组成结构上类似于心脏组织的三维电偶联网络和肌肉横纹,而且具 有心肌组织样收缩功能,为观察病损心肌的修复提供了可能性。

然而,现有多数的切片培养和灌流槽存在的一个重要缺陷就在于槽的封闭性和容积较大、 容量非可控。如果需要进行组织细胞的功能、尤其是电生理功能的研究和检测时,不能进行有 效实时记录观察。不能配合于激光共聚焦扫描显微镜的载物台和水浸镜头使用。也难以准确控 制组织或细胞的外环境。尤其是目前的灌流槽由于容量较大,对于组织细胞分泌的微量细胞因 子或神经递质难以实时、动态检测到,也不能配备兼容所有的显微镜观察。而大多数产品基于 在细胞实验台加温的恒温灌流会带来较大的电信号干扰,难以记录细胞本身的电生理活动。

实用新型内容

有鉴于此,本实用新型的目的是提供一种适用于形态学观察和功能研究的组织灌流槽。

本实用新型的目的是通过以下技术方案来实现的,一种适用于形态学观察和功能研究的组 织灌流槽,包括中心小室和分别连接于中心小室两侧的输入室和输出室,中心小室、输入室、 输出室相互独立且输入室与中心小室连接,中心小室与输出室连通,所述中心小室两侧各设置 有一由中心小室边缘向外延伸形成的斜面。

进一步,所述斜面向斜上方向延伸。

进一步,所述斜面与中心小室边缘的夹角为45°。

进一步,所述中心小室底部设置有盖玻片。

进一步,所述中心小室设置有尼龙压网。

进一步,所述中心小室与输入室和输出室通过底部设置的导流通道连通。

进一步,连接中心小室与输入室上的管路上设置有恒温加热装置。

进一步,连接中心小室与输入室上的管路上设置有氧气进入缓冲腔。

进一步,所述中心小室的容积为300uL。

本实用新型的优点在于:

本实用新型针对现有的器官、组织或细胞内灌流槽不容易实现恒温控制、或者温度加热容 易带来较大的工频电信号干扰,难以实现细胞分泌检测和电生理功能记录等部分缺陷,提出在 常规组织培养之外的开放式、恒温、恒流、恒定小容量的灌流槽,可适用于进行组织片的实时 形态学观察和电生理功能记录。灌流槽的中心小室的前后侧面设置特殊45°斜面,便于膜片 钳实验电极进出。也方便于应用于正置水浸物镜显微镜的物镜调节。

附图说明

为了使本实用新型的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合附图对本实用新型作进 一步的详细描述,其中:

图1是灌流槽的主视图;

图2是图1的A-A剖视图;

图3是图1的B-B剖视图;

图4A是灌流槽中的显微镜适配单元的主视图,图4B是灌流槽中的显微镜适配单元的剖 视图;

图5是灌流槽整装设备的主视图;

图6是图5的C-C剖视图。

具体实施方式

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