[发明专利]一种鉴别上清丸中黄柏的方法

说明书

本发明提供了一种采用薄层色谱法鉴别上清丸中黄柏的方法，其中薄层色谱法为：吸取供试品溶液3～5μl，对照药材溶液3～5μl，对照品溶液3～5μl，分别点于高效硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比为12:6:3:3:1的甲苯‑乙酸乙酯‑异丙醇‑甲醇‑浓氨溶液为展开剂，加入双槽展开缸中一槽，另一槽中加入适量浓氨水，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。本方法操作简便，分离效果快速、准确，重现性良好，专属性强，为上清丸的进一步质量控制提供依据。

技术领域

本发明属于中药制剂检测技术领域，具体涉及一种鉴别上清丸中黄柏的方法。

背景技术

上清丸收载于《卫生部药品标准中药成方制剂第十册》中，原质量标准较低，仅有性状和显微鉴别，目前尚无该制剂中黄柏鉴别的研究。

《中国药典》中药质量标准研究制定技术要求中明确指出：实验中应注重绿色环保要求，尽量采用毒害小，污染少的试剂、试药，避免使用苯等毒害性大的溶剂；使用对照药材应保证药材的主斑点在样品中均有对应的斑点，供试品色谱中不能只有对照药材色谱中的1-2个次要斑点相对应。[肖燕.上清丸质量标准的研究[J].中国民族民间医药,2008,08:35-37.]和2000年版《中国药典》一部中黄柏药材的鉴别，均使用盐酸小檗碱做为对照品，但展开剂体系中均含有苯；而在2015年版《中国药典》一部中，黄柏药材的鉴别项下，使用盐酸黄柏碱做为对照品，盐酸黄柏碱价格相对昂贵；因此现有技术中缺乏一种相对安全、低成本、且鉴别效果好的方法。

发明内容

本发明提供了一种采用薄层色谱法鉴别上清丸中黄柏的方法。上清丸制剂中，黄柏药材生粉入药但在处方中用量较少且粉蜜比达到1:1.7～1.8，其在上清丸制剂中含量不足4％。虽然其量小，但增加黄柏鉴别可为上清丸制剂的进一步质量控制提供依据。然而采用现有技术中的黄柏药材或其它含黄柏的中成药中的黄柏鉴别方法都无法得到较好的鉴别效果。

本发明技术方案如下：

一种采用薄层色谱法鉴别上清丸中黄柏的方法，包括如下步骤：

(1)供试品溶液的制备：

取本品2～4g，剪碎，加甲醇10-20ml，超声30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2～3ml使溶解，作为供试品溶液；

(2)对照药材溶液的制备：

取黄柏对照药材0.1～0.2g，同步骤(1)方法制成对照药材溶液；

(3)对照品溶液的制备：

取盐酸小檗碱1～2mg，精密称定，加甲醇溶解制成每1ml含0.5～1mg盐酸小檗碱的对照品溶液；(4)阴性样品溶液的制备：

取缺黄柏的阴性样品2～4g，同步骤(1)方法制成阴性样品溶液；

(5)薄层色谱法鉴别：

吸取步骤(1)-(4)中供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液、阴性样品溶液等体积量，各吸取3～5μl，分别点于同一薄层板上，以体积比为12:6:3:3:1的甲苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-浓氨溶液为展开剂，加入双槽展开缸中一槽，另一槽中直接加入大于或等于展开剂体积的浓氨水预饱和，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；另一槽中加入的浓氨水量不溢出至加入展开剂的那一槽中。

本发明所述鉴别上清丸中黄柏的方法优选为：

(1)供试品溶液的制备：

取本品2～4g，剪碎，加甲醇10-20ml，超声30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇2～3ml使溶解，作为供试品溶液；

(2)对照药材溶液的制备：