[发明专利]一种结肠宁制剂的检测方法

说明书

本发明公开了一种结肠宁的检测方法。方法包含：1)对照品溶液的制备；2)供试品溶液的制备；3)HPLC检测。本发明方法精密度高，重现性好，回收率高，测量结果准确，提高了结肠宁的质量可控性和稳定性，确保人们用药的安全性和有效性。

技术领域

本发明属于药物检测技术领域，特别涉及测定结肠宁制剂的检测方法。

背景技术

结肠宁是九芝堂股份有限公司的独家产品，具有活血化瘀，清肠止泻的功效，是治疗慢性结肠炎、结肠炎、溃疡性结肠炎、细菌性痢疾的特色灌肠剂。自问市以来，其质量标准一直在提升。结肠宁制剂是由蒲黄和丁香蓼两味药组成的处方制剂，目前企业内部标准主要是对其蒲黄、丁香蓼的定性鉴别以及丁香蓼中没食子酸的定量鉴别；然而处方中，蒲黄用量是丁香蓼的数倍，作为用料最多的原料，其定量方法一直是公司内部探索的重点难题。蒲黄在中国药典中的质量控制成分为香蒲新苷和异鼠李素-3-O-新橙皮苷，二者属于黄酮苷类成分；结肠宁工艺中有水煎煮过程，加热过程中对该类成分有一定的破坏，在前期的研究中，以药典的方法对其进行检测均显示含量低于0.02％；因此在不影响结肠宁总体质量的前提下，目前建立了一种合适的检测方法。

发明内容

本发明的目的就是针对结肠宁目前对于蒲黄的含量控制的缺少简便经济的方法而开发的检测方法。此方法包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：

称取异鼠李素-3-O-新橙皮苷、香蒲新苷对照品，置于容量瓶中，加25％～75％乙醇或甲醇，超声溶解并定容至刻度，摇匀，制成对照品溶液；

(2)供试品溶液的制备：

结肠宁供试品溶液的制备：取结肠宁样品置于容量瓶中，精密称定，加25％～75％甲醇醇或乙醇至近刻度，超声30～90min，冷却至室温，定容至刻度，过滤；以0.45μm滤膜过滤即得。

(3)HPLC检测：

分别吸取步骤(1)和(2)所得的对照品溶液和结肠宁制剂供试品溶液，分别注入高效液相色谱仪中进行测定；

其中，色谱条件为：色谱柱为C₁₈反相色谱柱；紫外检测器；柱温为30～40℃；检测波长为254nm；流动相A为乙腈，流动相B为0.05～0.2％磷酸溶液，流速为0.8～1.2ml/min；分析时间85分钟；梯度洗脱，梯度洗脱程序见表1：

表1梯度洗脱程序表

所述步骤(1)对照品溶液的制备优选为下述方法进行：

称取异鼠李素-3-O-新橙皮苷、香蒲新苷2mg置于10ml容量瓶中，加25～75％乙醇或甲醇，超声溶解并定容至刻度，摇匀，制成对照品溶液。

所述步骤(2)供试品溶液的制备优选为下述方法进行：

取结肠宁样品约3～5g置于10ml容量瓶中，精密称定，加30～70％甲醇或乙醇至近刻度，超声30～90min，冷却至室温，定容至10ml，过滤；以0.45μm滤膜过滤即得。

所述步骤(3)中的色谱柱优选柱长为250mm的C₁₈反相色谱柱。

所述步骤(3)中流动相B优选为0.1％磷酸溶液。

所述步骤(3)中流速优选为1ml/min。

所述步骤(1)和(2)中乙醇或甲醇浓度优选为50％。

所述步骤(2)中超声处理时间优选为30分钟。

所述步骤(3)中柱温为35℃。

为更好的表明本发明的实质，将本发明的方法学考察详述如下：

1仪器与试药