[发明专利]一种白僵蚕的人工制备方法

说明书

本发明公开一种白僵蚕的人工制备方法，包括(1)球孢白僵菌孢子液的制备：用无菌水浸泡、清洗白僵蚕蚕体，过滤后取滤液，经过一级斜面培养、二级种子培养、三级扩大培养后得球孢白僵菌孢子液；(2)病原攻毒：球孢白僵菌孢子液在制成后的45min内，迅速喷施于5龄起蚕的蚕体，喷施完成后密闭蚕房1‑1.5h；(3)蚕体培养：打开蚕房，对蚕体喂食，每隔3‑4h喂食一次，直至蚕体死亡；(4)白僵蚕培养：将死亡后的蚕体转移至蚕座上，在温度为25‑28℃，湿度为95‑98％的条件下继续培养至蚕体僵化，并长出白色菌丝分生孢子；(5)白僵蚕成品制备：将长出白色菌丝分生孢子的白僵蚕收集后干燥至水分小于10％，即得白僵蚕成品。其白僵蚕成品的制备周期短，产量和质量高。

技术领域

本发明涉及一种白僵蚕的人工制备方法。

背景技术

白僵蚕为蚕蛾科动物家蚕蛾的幼虫感染白僵菌而僵死的全虫。白僵蚕是一味药用价值较高的中药，其味咸、辛，性平，可治面上黑及碍容性疾病，白僵蚕含有氨基酸和活性丝光素，有营养皮肤和美容作用；含蛋白质有刺激上皮脂腺，调节性激素分泌的作用；含维生素E，能清除自由基，抗脂质氧化形成的老年斑；含活性丝光素能促使皮肤细胞新生，调节皮脂，改善皮肤微循环，可增白防晒。

过去白僵蚕均为自然死亡，后来进行人工接种培养，在蚕4次蜕皮，接种后，蚕陆续发病死亡，及时拣出，另行摊放，保持同样温度，待其充分发僵变白后，置于通风处，风干或弱光下晒干。然而现有的人工生产的白僵蚕，仍然存在一些问题，如感染后的蚕体从死亡到僵化时间较长，白僵蚕的僵化率较低，僵化时间不整齐，质量不稳定，产量较低，成本也较高，不能达到产业化生产。

发明内容

有鉴于此，本申请提供一种白僵蚕的人工制备方法，其采用的球孢白僵菌孢子液经过复壮，提高了攻毒活性，僵化率高，通过攻毒、蚕体培养、白僵蚕培养过程中温度、湿度等条件的改进，缩短了白僵蚕成品的制备周期，提高了白僵蚕的产量和质量。

为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是一种白僵蚕的人工制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

(1)球孢白僵菌孢子液的制备：用无菌水浸泡、清洗白僵蚕蚕体，过滤后取滤液，经过一级斜面培养、二级种子培养、三级扩大培养后得球孢白僵菌孢子液；

(2)病原攻毒：步骤(1)所述球孢白僵菌孢子液在制成后的45min内，迅速喷施于5龄起蚕的蚕体，喷施完成后密闭蚕房1-1.5h；

(3)蚕体培养：打开步骤(2)所述蚕房，对蚕体喂食，每隔3-4h喂食一次，直至蚕体死亡；

(4)白僵蚕培养：将步骤(3)死亡后的蚕体转移至蚕座上，在温度为25-28℃，湿度为95-98％的条件下继续培养至蚕体僵化，并长出白色菌丝分生孢子；

(5)白僵蚕成品制备：将步骤(4)长出白色菌丝分生孢子的白僵蚕收集后干燥至水分小于10％，即得白僵蚕成品。

优选的，步骤(1)所述一级斜面培养的温度为25-28℃，所述二级种子培养和三级扩大培养的温度为5-10℃。

优选的，步骤(1)所述二级种子培养和三级扩大培养的培养基，其组分按重量百分比计包括：PDA培养基，补充10-20％马铃薯淀粉、5-20％蔗糖、10-15％蛋白胨、0.1-0.5％磷酸二氢钾、0.01-0.05％硫酸镁、5-15％蚕蛹粉、0.01-0.05％维生素B、0.01-0.05％维生素C、0.05-0.1％氯化铁、0.05-0.1％氯化钙。

更为优选的，步骤(1)所述二级种子培养和三级扩大培养的培养基，其组分按重量百分比计包括：补充18％马铃薯淀粉、15％蔗糖、12％蛋白胨、0.3％磷酸二氢钾、0.02％硫酸镁、12％蚕蛹粉、0.03％维生素B、0.02％维生素C、0.08％氯化铁、0.06％氯化钙。

优选的，步骤(2)所述病原攻毒的温度为22-24℃，湿度为98％以上。