[发明专利]一种增殖促进剂及其应用

说明书

本发明涉及一种增殖促进剂及其应用，具体涉及能够促进成纤维细胞增殖的成纤维细胞增殖促进剂，及通过成纤维细胞制备得到的成纤维细胞提取物和成纤维细胞提取物冻干粉，所述增殖促进剂包括丝瓜皂苷和/或苦瓜皂苷。本发明在皮肤成纤维细胞的培养中采用了丝瓜皂苷和苦瓜皂苷组合诱导剂，有效促进了皮肤成纤维细胞源性的生物活性物质的合成和分泌，增加细胞衍生产物中有效成分的含量，提高了生产效率和皮肤成纤维细胞源性细胞衍生产物的生物学功效。

技术领域

本发明涉及生物学领域，涉及一种增殖促进剂及其应用，具体涉及能够促进成纤维细胞增殖的成纤维细胞增殖促进剂，及通过成纤维细胞制备得到的成纤维细胞提取物和成纤维细胞提取物冻干粉。

背景技术

目前，各类护肤品主要以化学成分为主，再辅以植物提取物和其他营养物质制备而成，虽具有一定的效果，但因其安全性或有效性问题，具有很大局限性。由此基于安全性、功能性和自然性的“绿色护肤品”成为当前发展的趋势。

以皮肤成纤维细胞为基础资源，发挥细胞所含的生物活性物质(例如胶原蛋白、细胞因子、氨基酸、维生素等)，已被医学或生物学等领域的专业人员所广泛研究和应用实践。这些生物活性成分通过旁分泌、自分泌或内分泌等方式发挥作用，具有多效性、重叠性、拮抗性、协同性等多种生理特性，能够有效活化细胞、促进细胞分裂、促进皮下新血管生成及胶原蛋白的分泌，从而促进皮肤的生长，再生和修复。例如，胶原蛋白能够促进多种细胞的迁移，加速创面愈合速度；碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对创伤修复涉及的神经纤维化、血管和再上皮化具有调控作用，可促进皮肤创面的损伤愈合和减少疤痕的形成；转化生长因子(TGF)、血小板衍生生长因子(PDGF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)等细胞因子能够促进上皮细胞的增殖和分化，调节细胞新成代谢，促进细胞基质(例如胶原蛋白、细胞粘附因子、纤维连接蛋白等)的合成，补充皮肤所必需养分；角质细胞生长因子(KFG)在辐射损造成的上皮细胞损伤修复方面具有重要的作用。

既往，皮肤成纤维细胞常以新鲜制备的皮肤成纤维细胞，独立或与其他成分(如角质细胞、黑色素瘤细胞、人富血小板血浆)混合通过皮下注射给药，发挥细胞生物学活性和自分泌营养因子的功能。CN104611289A公开了一种人表皮细胞和成纤维细胞同时制备的方法及其生物美容产品，通过酶消化法制备人的皮肤成纤维细胞并与人的富含血小板血浆混合，生产出含有自体活细胞的生物美容产品。基于此类的技术方案，多采用有创或微创的方式给药(如手术植入、注射等)。这种技术具有局限性，一方面由给药方式所引发的不良反应或风险恐难以避免，如感染、红肿、疼痛等；另一方面，其适用的领域亦可能相应受限，例如更适用于专业机构。

当前，以细胞条件培养基或细胞裂解物制备的细胞精华液、冻干粉或其他生物制剂已常被报道，CN103908424A公开的一种用于美容保养的精华液及其制备方法和CN103393585B公开的一种用于美容保养的成纤维细胞液的制备方法，以上两个专利通过培养成纤维细胞，收集细胞条件培养基，加入甘油等冻干赋形剂及细胞因子，制备成皮肤保养的精华液，具有促进表皮细胞新陈代谢的作用。为了避免异种来源的蛋白质可能导致的过敏、免疫排斥等反应的发生，CN10326984A公开的局部皮肤制剂，其开发了含有从自体皮成纤维细胞培养物获得的条件培养基的自体局部制剂，再将其应用于凝胶、乳膏、洗剂和软膏的制备。基于此类的技术方案，它克服了一些早期技术方案的局限，例如更适宜长期储存，采用外用方式(例如采用涂抹或者喷雾)更有利于推广和应用。但是一方面细胞自然分泌的生物活性物质含量有限，另一方面这些生物活性的透皮吸收多未被考虑，导致其功能和生物活性受到很大限制。