[发明专利]食品中B族维生素的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测方法，具体涉及一种食品中B族维生素的检测方法。

背景技术

B族维生素是维持人体正常机能与代谢活动不可或缺的水溶性维生素，它在人体内无法自行制造合成，必须额外补充。然而紧张的生活、工作压力中，不当的饮食习惯或因某些特定药物的使用，以及B族维生素本身溶于水的属性，均会使人体内的B族维生素快速被消耗。

中国2015年11月18日公开的专利(公布号：CN 105067721A)报道了采用高效液相法测定B族维生素的方法，但其采用的检测器为紫外检测器，检测的灵敏度较低。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种灵敏度和准确度均较高的食品中B族维生素的检测方法，该方法能同时检测8种以上B族维生素。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种食品中B族维生素的检测方法，其包括以下步骤：

(1)将食品样品进行前处理，得到上样液；

(2)采用HPLC-MS/MS进行分析：采用HPLC-MS/MS分别测定B族维生素标准溶液和步骤(1)得到的上样液，将上样液的测定结果与B族维生素标准溶液的测定结果进行比较，对食品样品中的B族维生素进行定性或定量；

HPLC-MS/MS进行分析时，HPLC的条件为：色谱柱为C18柱；流动相由水相和有机相组成，所述水相由水、甲酸和甲醇组成，且所述甲酸和甲醇与水的体积比均为0.1～0.3％；所述有机相由甲酸和甲醇组成，且所述有机相中，甲酸与甲醇的体积比为0.1～0.3％；在流速为0.5～0.6mL/min的条件下进行梯度洗脱；

HPLC-MS/MS进行分析时，质谱检测的条件为：采用电喷雾离子源，检测器为三重四级杆串联质谱检测器。

本发明检测食品中B族维生素时，由于分离过程中采用了特定的固定相和流动相，本发明B族维生素的分离度较高，分离效果较好。并且，流动相中加入的新型离子对试剂可以延长待测物质在色谱柱上的保留时间。同时，本发明采用三重四级杆串联质谱作为检测器，本发明检测B族维生素的灵敏度较高、检出限较低，具体地：维生素B1的检出限为0.005ug/mL，核黄素的检出限为0.001ug/mL，维生素B6的检出限为0.025ug/ml，维生素B12的检出限为0.025ug/mL，烟酸的检出限为0.020ug/mL，泛酸的检出限为0.007ug/mL，生物素的检出限为0.005ug/mL，叶酸的检出限为0.005ug/mL。

本发明检测食品中B族维生素的准确度较高，且能同时用于食品中8种以上B族维生素的检测。

作为本发明所述食品中B族维生素的检测方法的优选实施方式，所述水相中，甲酸和甲醇与水的体积比均为0.1％；所述有机相中，甲酸与甲醇的体积比为0.1％。在水相中加入甲酸，可提高离子化效率，从而提高仪器对目标物的检测灵敏度。

作为本发明所述食品中B族维生素的检测方法的优选实施方式，所述流速为0.5mL/min；所述梯度洗脱的条件为：时间为0.01分钟时，流动相中水相的体积百分比为95％；时间为0.01-3分钟时，流动相中水相的体积百分比等速率递减，时间为3分钟时，流动相中水相的体积百分比为60％；时间为3-8.5分钟时，流动相中水相的体积百分比等速率递减，时间为8.5分钟时，流动相中水相的体积百分比为5％；时间为8.6～13分钟时，流动相中水相的体积百分比为95％。

申请人研究了不同洗脱方式，并考察了多种梯度洗脱条件和多种流速，结果发现：在所述流速和洗脱条件下，B族维生素的分离效果是最好的。

作为本发明所述食品中B族维生素的检测方法的优选实施方式，所述色谱柱的柱温为40℃。

作为本发明所述食品中B族维生素的检测方法的优选实施方式，所述色谱柱的规格为150×4.6mm(即色谱柱的长为150mm，内径为4.6mm)，粒径为4μm。

作为本发明所述食品中B族维生素的检测方法的优选实施方式，所述步骤(2)中，质谱检测时，离子化温度为450～550℃，且采用正离子化模式扫描。

作为本发明所述食品中B族维生素的检测方法的优选实施方式，所述离子化温度为500℃。

作为本发明所述食品中B族维生素的检测方法的优选实施方式，所述B族维生素包含维生素B1、核黄素、烟酸、泛酸、维生素B6、叶酸、生物素和维生素B12中的至少一种；所述B族维生素的检测参数如表1所示：

表1