[发明专利]一种瓦氏葡萄球菌及其应用

说明书

本发明公开了一种瓦氏葡萄球菌，其分类命名为瓦氏葡萄球菌KR809427（Straphylococcus warneri KR809427），保藏编号为CCTCC NO:M 2016599，该菌株已于2016年10月31日保藏于中国典型培养物保藏中心。本发明公开了瓦氏葡萄球菌在提高土壤pH值和钝化土壤中铜活性方面的应用。本发明还公开了一种应用菌剂。本发明的瓦氏葡萄球菌CCTCC NO:M 2016599生长迅速，具有较强的耐铜、耐酸碱、耐盐能力，并且能显著提高培养介质的pH值、降低土壤有效铜的含量，因此对于不同类型铜污染土壤具有较好的修复潜力。

技术领域

本发明属于环境应用微生物领域，具体涉及了一种瓦氏葡萄球菌及其应用；具体涉及在铜污染土壤修复方面的应用。

背景技术

铜矿是一种重要的金属矿产，具有悠久的开发历史，为工业发展提供了大量的资源。但是，由于以往环保措施不足，铜矿开采和冶炼过程中对周边环境产生了污染，铜成为了矿区周边土壤中主要的污染物，破坏了该区域的环境质量，也危害了生态和人体健康。因此，治理铜污染仍是世界各国环境热点研究问题之一。

迄今为止，土壤铜污染治理的方法包括物理方法、化学方法、生物方法等。物理方法包括换土、淋洗等措施，能在较短时间内减少土壤铜含量，但需要大量费用，且容易造成二次污染。化学方法有添加改良剂如矿物和有机质等，可降低土壤铜活性，但大量施用可能影响土壤孔隙度、持水量、pH等理化性状。生物方法则是利用生物本身的代谢过程，改变土壤铜的赋存形态，减少铜的毒性，阻断铜进入食物链，达到无害化处理的目的。

铜矿环境中存在着多种抗铜细菌，数量多、生长快，是近年来环境铜污染生物修复研究的主要对象。这些细菌在经过分离、培养和驯化后，能与适当的工艺相结合，构建出修复土壤铜污染的技术体系，在铜矿环境整治和生态恢复方面具有良好的应用前景。

发明内容

发明目的：为了解决现有技术中存在的问题，本发明所要解决的第一个技术问题是提供一种瓦氏葡萄球菌。

本发明所要解决的第二个技术问题是提供一种瓦氏葡萄球菌的应用。

本发明所要解决的第三个技术问题是提供一种应用菌剂。

技术方案：为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案为：一种瓦氏葡萄球菌，其分类命名为瓦氏葡萄球菌KR809427(Straphylococcus warneri KR809427)，保藏编号为CCTCC NO:M 2016599，该菌株已于2016年10月31日保藏于中国典型培养物保藏中心。保藏地址：湖北省武汉市武昌区武汉大学保藏中心，邮编：430072。

其中，上述瓦氏葡萄球菌的筛选方法包括以下步骤：

1)土壤细菌的提取：取铜污染土壤添加到无菌水中悬浮得到细菌培养液；

2)耐铜细菌的初步筛选：配置细菌基础培养基LB培养基，其中添加硫酸铜溶液，灭菌，冷却后得到含铜的LB固体培养基，取细菌培养液涂布接种于LB固体培养基平板上；

3)耐铜细菌的进一步筛选：制备含有200mg/L和300mg/L铜浓度的LB固体培养基，根据步骤2)平板上菌落的形态和颜色性状，挑取菌落划线依次接种于200mg/L和300mg/L的含铜固体平板培养基上，从形成的菌落中得到耐铜细菌；

4)菌株的纯化：从含有300mg/L铜浓度的LB固体培养基中挑取细菌，划线接种到不含铜的LB固体培养基上，再进行多次划线，直到获得瓦氏葡萄球菌CCTCC NO:M 2016599。

上述的瓦氏葡萄球菌CCTCC NO:M 2016599在提高土壤pH值中的应用。

其中，上述土壤为酸性土壤。