[发明专利]一种来源于厚壳贻贝闭壳肌的降压肽

说明书

技术领域

本发明涉及多肽提取技术领域，具体是一种来源于厚壳贻贝闭壳肌的降压肽。

背景技术

高血压是对人类健康危害严重的一种疾病，也是引起心血管疾病的主要因素，其危害是造成脑、心、肾等重要器官的损害。脑卒中和冠心病是高血压最严重的并发症。资料表明，世界各国的平均发病率为10% ～ 20%，每年因高血压死亡的人数达1200 万。目前，我国现有高血压患者已超过1.2 亿人口。因此，治疗和预防高血压病是当今社会十分重要的课题。

现阶段高血压病的医学研究主要集中在ACE 的抑制物质（ACEI）方面。目前，大多用化学合成的ACEI 如卡托普利(Captopril)、依那普利(Enalapril)、赖诺普利(Listinopril) 等药物来治疗高血压。这类药物具有作用时间短，停药后血压易反弹等缺点，以及引起咳嗽、味觉丧失、肾脏损伤及血管神经性水肿等副作用。血管紧张素源（RAS）和激肽源（KXS）在血压调节方面是一对相互拮抗的体系，而血管紧张素转化酶（ACE）则对两者起到调控作用，现在科学研究普遍认为，ACE 过高是导致高血压病的根本病因。所以要从根本上控制甚至治疗高血压病，必须要从一定程度上抑制ACE 的分泌。由于海洋生态环境的特殊性（如高压、低温等），使得贻贝闭壳肌蛋白质具有多种特异性氨基酸的组成和序列，贻贝闭壳肌蛋白质水解后暴露出降压的活性位点，从而使贻贝闭壳肌活性肽具有降压效果。同时，贻贝闭壳肌蛋白活性肽具有低抗原性的特点，安全性高，无毒副作用。因此贻贝闭壳肌蛋白质是制备降压肽的重要药源，贻贝闭壳肌降压肽的开发将成为高血压非药物治疗的重要组成部分。

制备活性肽的方法主要有：直接提取、体外降解和利用重组DNA 技术、酶法或化学法合成活性肽。体外水解蛋白质制备活性肽有三条工艺路线：酸水解、碱水解和酶法水解。前二者方法简单，但存在营养和毒理方面的有害效应，因此在食品加工中的应用受到了极大的限制。蛋白质的酶法水解一般不会导致营养方面的损失，也不会产生毒理上的问题；同时酶作用具有特异性，可在温和的条件下进行，能耗也低，所以酶法水解在食品加工中经常应用。

现有技术如授权公告号为CN102286590B的中国发明专利，公开了一种海蜇降压肽的制备方法，包括：对海蜇的去金属离子处理，并依次进行匀浆、酶解、灭酶、浓缩、超滤及冷冻干燥等步骤，最终获得纯化的海蜇降压肽粉末。本方法结合现代酶工程技术，提供了一种新的高效的海蜇降压肽的生产途径，提高了海蜇资源的利用效率，具有操作简单、提取率高、产物活性保存好的特点，海蜇降压肽生产成本降低。其充分利用海蜇丰富的蛋白质资源，通过去金属离子处理将海蜇体内各种金属离子基本去除干净，使后续酶解和应用更加安全。用高血压SHR 大鼠模型进行海蜇降压肽降压活性试验结果显示：该方法组与空白对照组相比差异有显著性，本方法制备的海蜇降压肽具有与阳性对照卡托普利相似的降血压活性。该方法只采用一种蛋白酶进行酶解，酶解不充分，且醇沉会使一部分降压肽失去活性，最后得到的降压肽活性不高。现有技术如授权公告号为CN102251003B的中国发明专利，公开了一种海洋生物源降压肽的制备工艺，它包括如下步骤：（1）预处理海洋生物副产品，除掉海洋生物副产品的表面杂质和脂肪；（2）酶法提取海洋生物源蛋白质；（3）膜分离的工艺技术分离纯化提取液，得到海洋生物源蛋白质；（4）蛋白酶酶解海洋生物源蛋白质，酶解结束后灭酶，得到海洋生物源降压肽溶液；（5）喷雾干燥快速干燥海洋生物源降压肽溶液，得到蛋白质含量大于90％的海洋生物源降压肽粉成品。采用上述工艺后，所制得海洋生物源降压肽成本低、降压活性高，平均相对分子量低、纯度高，并充分利用了海洋生物副产品，变废为宝，适合大规模工业化生产。该方法需要用到碱液和酸液，会产生酸碱废水，对环境不友好；蛋白酶中没有添加酶激活剂，酶解效率有待提高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种分子量小，纯度高，活性强的来源于厚壳贻贝闭壳肌的降压肽，其制备方法酶解充分，提取率高，操作简单。

本发明针对背景技术中提到的问题，采取的技术方案为：

一种来源于厚壳贻贝闭壳肌的降压肽，具体操作步骤：

1）预处理：将厚壳贻贝闭壳肌取出，用清水清洗3~5次，高速匀浆，按料液体积比1:20~40加入去离子水，浸泡时间为0.5~1.2h，搅拌，搅拌速率为200~400r/min，过滤。通过高速匀浆将厚壳贻贝闭壳肌细胞破坏，让细胞中的物质流出。无机盐、金属离子和其他小分子溶于水的杂质溶解在去离子水中，油脂漂浮在水面上，通过过滤，将这些杂志去除；