[发明专利]一种利用Genomic-SSR和EST-SSR两类标记鉴评蝴蝶兰遗传多样性的方法

权利要求书

1.一种鉴评蝴蝶兰遗传多样性的引物组合物，其特征在于，所述引物组合物由2对Genomic-SSR引物和8对EST-SSR引物组成，2对Genomic-SSR引物分别为G-1和G-2，G-1的序列如SEQ ID NO：1～2所示，G-2的序列如SEQ ID NO：3～4所示；8对EST-SSR引物分别为E-1、E-2、E-3、E-4、E-5、E-6、E-7、E-8，E-1的序列如SEQ ID NO：5～6所示，E-2的序列如SEQ IDNO：7～8所示，E-3的序列如SEQ ID NO：9～10所示，E-4的序列如SEQ ID NO：11～12所示，E-5的序列如SEQ ID NO：13～14所示，E-6的序列如SEQ ID NO：15～16所示，E-7的序列如SEQID NO：17～18所示，E-8的序列如SEQ ID NO：19～20所示。

2.权利要求1所述的引物组合物在鉴评蝴蝶兰遗传多样性中的应用。

3.一种鉴评蝴蝶兰遗传多样性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)提取待分析蝴蝶兰的总DNA；

(2)对权利要求1所述的引物组合物进行荧光标记后，以步骤(1)的DNA为模板分别进行PCR反应；

(3)记录每对引物的扩增峰型，对获得的数据进行分析处理，评价蝴蝶兰种质的遗传多样性。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，提取待分析蝴蝶兰的总DNA时，以蝴蝶兰的嫩根作为提取样本。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述PCR的扩增体系为DNA模板1µl、5µM的上下游引物1µl、5U/µl 的Taq酶0.1µl、缓冲液6µl、加水补充至15µl。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述PCR的扩增程序为95℃，5min；94℃，30sec；58℃，35sec；35个循环；72℃，35sec，60℃，30min；15℃。