[发明专利]一种复合酶和添加剂及它们的应用以及脱除玉米赤霉烯酮或α-玉米赤霉烯醇的方法

说明书

本发明涉及微生物领域，公开了一种复合酶和添加剂及它们的应用以及脱除玉米赤霉烯酮或α‑玉米赤霉烯醇的方法。具体地，本发明提供了一种复合酶，该复合酶含有内酯酶和漆酶，且所述内酯酶与所述漆酶的重量比为1：1‑10。本发明将内酯酶和漆酶组合使用，由此得到的复合酶能够高效且安全地脱除ZEN及其主要代谢产物α‑ZOL，特别是将其应用于粮油或饲料中时，不仅可以高效且安全地脱除其中的ZEN和α‑ZOL，还不会影响粮油或饲料的适口性，具有良好的工业应用前景。另外，在本发明的一种优选的实施方式中，复合酶还含有铜剂，例如，叶绿素铜钠盐和/或叶绿素铜钾盐，可以进一步提高ZEN及其主要代谢产物α‑ZOL的脱除率。

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体地，涉及一种复合酶，含有该复合酶的添加剂，所述复合酶和/或添加剂在脱除玉米赤霉烯酮和/或α-玉米赤霉烯醇中的应用，以及一种脱除玉米赤霉烯酮和/或α-玉米赤霉烯醇的方法。

背景技术

玉米赤霉烯酮(Zearalenone，ZEN)是由镰刀菌产生并释放到土壤环境中的真菌毒素，它是世界上污染范围最广泛的一种镰刀菌毒素。1999年，D.Mello等人研究发现，ZEN能够降低怀孕动物的胚胎成活率及新生胎儿的出生率。ZEN对人体的影响主要是引发肿瘤、诱导DNA收缩、导致染色体失常等。此外，ZEN可与17β-雌二醇受体结合，导致脂肪氧化反应、细胞凋亡并导致蛋白质和DNA合成的抑制，还可以抑制其它大分子的生物合成。另外，在植物体内，ZEN主要代谢为α-玉米赤霉烯醇(α-Zearalenol，α-ZOL)，有研究表明，α-ZOL产生的毒性是ZEN的数倍。因此，严格控制粮油或饲料中ZEN及其主要代谢产物α-ZOL的含量十分有必要。

ZEN作为世界上污染粮油或饲料最广泛的真菌毒素之一，在欧洲、非洲、北美洲、南美洲等世界各地的谷物中以及农副产品中都检测到了ZEN的存在。ZEN可以通过污染谷类等农作物，进而进入人或动物体内，危害人和动物的健康，造成巨大的经济损失。同时，ZEN本身具有分布广、繁殖快、耐热、毒性大、残留时间长等问题，已经引起了全世界的关注。目前，大部分国家对粮油或饲料中的ZEN含量都作了十分严格的规定，例如，澳大利亚规定谷物中ZEN的含量不能超过50ng/g；意大利规定在谷物和谷类产品当中ZEN的含量不能超过100ng/g；在法国，植物油和谷类当中ZEN的含量必须低于200ng/g。

目前，脱除ZEN毒素的方法主要分为物理法、化学法和生物法。物理法包括机械分离处理、高温失活、放射处理或吸附剂等；化学法是通过酸碱溶液或其它化合物对毒素进行处理。然而，通过物理和化学处理以脱除ZEN的方法具有局限性。例如，通过热处理，不能有效地使ZEN钝化；通过挤出和使用氧化剂进行处理，虽然可以在一定程度上降低ZEN的含量，但是在饲料和食品的制备过程中采用挤出方法和使用氧化剂(如臭氧或过氧化氢)，由于成本较高、处理样品的品质损失、效率和特异性较低而受到限制。总之，由于物理法存在着成本高、操作难、处理后的产物可能对粮油、饲料或环境造成污染等缺点，化学法可能会改变饲料的性状，产生有害残留物，从而存在食品安全问题等缺陷，从而限制了这两种方法在实际生产中的应用。

生物法主要是利用微生物或其降解产物进行ZEN降解的过程，具有对原料的感官性状、营养物质影响较小等优点，同时，还具有安全、环保、高效的特点，因此，利用现代生物技术去除粮油或/饲料中ZEN的研究具有良好的应用前景。已有研究表明，目前，研究报道表明多种微生物具有降解ZEN的作用，例如，枯草芽孢杆菌、粉红粘帚霉、米根霉、匍枝根霉、少根根霉、黑曲霉、解毒毛孢酵母等。但是，将上述细菌或真菌应用于粮油或饲料中进行ZEN降解时，很可能会对粮油或饲料的适口性造成一定的影响，并且产生的ZEN降解率还有待进一步的提高。

然而，迄今为止，很少见到关于使用生物法同时降解ZEN及其主要代谢产物α-ZOL的相关报道，由于α-ZOL很可能在植物体内代谢产生，进而污染粮油或饲料产品，因此，十分有必要寻找一种能够同时降解粮油或饲料中的ZEN及其主要代谢产物α-ZOL的生物方法。

发明内容