[发明专利]一种动物胚胎培养基

说明书

本发明提供一种高效的动物胚胎培养基，其组成如下：氯化钠，氯化钾，氯化钙，磷酸二氢钾，硫酸镁，碳酸氢钠，β‑巯基乙醇，转铁蛋白，葡萄糖，乳酸钠，乳酸钙，丙酮酸钠，乙二胺四乙酸钠，谷氨酰胺，牛血清白蛋白，胎牛血清，HEPES，NEAA(100×)，小分子物质。本发明动物胚胎培养基用于注射后培养较现有技术的培养基，大幅提高了100％ES来源小鼠的产率，使得用囊胚前胚胎ES注射法完全取代传统的囊胚ES注射法成为可能。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及生物基因技术领域，具体涉及一种一种动物胚胎培养基。

背景技术

ES基因打靶是通过同源重组将外源基因定点整合入ES细胞基因组上某一确定的位点，从而实现定点修饰改造染色体上某一基因的技术。将基因打靶后的ES细胞用显微注射的办法导入胚胎中就可以生产出基因修饰小鼠。

ES基因打靶技术制备基因修饰小鼠可以分为ES基因打靶和ES胚胎显微注射获取基因修饰小鼠(以下简称ES显微注射)两个阶段。在这过程中，需要进行胚胎体外培养，在ES细胞注射入胚胎后还会有一段时间的ES和胚胎共培养，直到外源ES细胞完全融入或取代内细胞团。但现有的胚胎培养基均是单纯针对胚胎培养设计的，不利于共培养阶段ES细胞的发育，进而导致传统ES细胞胚胎显微注射很难获得100％ES来源的小鼠。。

因此，亟需一种可以同时满足胚胎和ES细胞发育条件的新型胚胎培养基。

发明内容

本发明目的在于针对现有技术的不足，提供一种高效的动物胚胎培养基。

为实现上述目的，本发明的技术方案是：一种动物胚胎培养基，其组成如下：

；其中NEAA(100×)的成分为：

成分	浓度(g/100mL)
脯氨酸	0.01-0.1
丙氨酸	0.01-0.1
丝氨酸	0.01-0.1
甘氨酸	0.01-0.1
天冬酰胺	0.05-0.5
天冬氨酸	0.05-0.5
谷氨酸	0.05-0.5