[发明专利]与油菜蕾苔期抗旱性相关的功能标记及其应用有效
| 申请号： | 201611240909.X | 申请日： | 2016-12-27 |
| 公开（公告）号： | CN108251417B | 公开（公告）日： | 2020-09-25 |
| 发明（设计）人： | 陆光远;李春生 | 申请（专利权）人： | 湖北工程学院 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 王闯 |
| 地址： | 432000 *** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 油菜 蕾苔期 抗旱性 相关 功能 标记 及其 应用 | ||
1.一种与油菜蕾苔期抗旱性相关的功能标记，其特征在于，所述功能标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
2.鉴定油菜蕾苔期抗旱性的引物对，其特征在于，所述引物对为引物BnDM-413-F和引物BnDM-413-R：
所述引物BnDM-413-F为：5′-GCCACCGGTATCTTTCCGTTA-3′；
所述引物BnDM-413-R为：5′-GTGCCACTGGCTTGTTTTCTT-3′。
3.鉴定油菜蕾苔期抗旱性的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)以待鉴定油菜的总DNA为模板，采用引物BnDM-413-F和引物BnDM-413-R进行PCR扩增；
所述引物BnDM-413-F为：5′-GCCACCGGTATCTTTCCGTTA-3′；
所述引物BnDM-413-R为：5′-GTGCCACTGGCTTGTTTTCTT-3′；
(2)检测所述PCR扩增的产物的核苷酸序列，如果所述PCR扩增的产物的核苷酸序列和与油菜蕾苔期抗旱性相关的功能标记的核苷酸序列相同，则所述待鉴定油菜为抗旱性；如果所述PCR扩增的产物的核苷酸序列和与油菜蕾苔期抗旱性相关的功能标记的核苷酸序列不同，则所述待鉴定油菜为抗旱敏感性，所述油菜蕾苔期抗旱性相关的功能标记的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，
所述PCR扩增的反应体系为：
待鉴定油菜的总DNA 25ng/μL 2μL，引物BnDM-413-F 50ng/μL 1μL，引物BnDM-413-R50ng/μL 1μL，10×PCR buffer 2μL，dNTPs 10mmoL/L 0.4μL，MgCl2 25mmoL/L 1.6μL，Taq酶5U/μL 0.5μL，ddH2O 11.5μL；
所述PCR扩增的条件为：94.0℃变性30s，58.0℃复性30s，72.0℃延伸45s，40个循环；72.0℃延伸10min；4℃反应终止。
5.权利要求1所述的功能标记、权利要求2所述的引物对在鉴定油菜蕾苔期抗旱性中的应用。
6.权利要求1所述的功能标记、权利要求2所述的引物对、权利要求3或4所述的方法在油菜育种中的应用。
7.一种油菜育种方法，其特征在于，按照权利要求3或4所述的方法，选择抗旱性的油菜单株作为亲本进行育种。
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