[发明专利]检测糖酵解相关基因的产品在制备鼻咽癌诊断试剂盒中的应用有效
申请号: | 201611240543.6 | 申请日: | 2016-12-29 |
公开(公告)号: | CN106755435B | 公开(公告)日: | 2020-10-02 |
发明(设计)人: | 王晖;赵宇 | 申请(专利权)人: | 王晖 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 410006 *** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 酵解 相关 基因 产品 制备 鼻咽癌 诊断 试剂盒 中的 应用 | ||
1.检测糖酵解相关基因的产品在制备鼻咽癌诊断试剂盒中的应用,其特征在于,所述糖酵解相关基因分别为GCK基因、HK2基因及HIF1-α基因,其序列分别为SEQ ID NO:1、SEQID NO:2及SEQ ID NO:3所示,所述鼻咽癌诊断试剂盒以所述糖酵解相关基因GCK、HK2及HIF1-α作为诊断标志物;
所述试剂盒包括PCR引物、DNA标准品及PCR反应液;
所述PCR引物包括针对GCK rs2244164位点、HK2 rs656489位点及HIF1-αrs10136168位点的引物组,所述引物组包括:
(1)对于GCK rs2244164位点,
扩增引物为:
GCK rs2244164正向扩增引物:
5’-ACGTTGGATGCATAATGTGTTTTCTCCGCC-3’;
GCK rs2244164反向扩增引物:
5’-ACGTTGGATGGGGACTTACTCCTGATCTAC-3’;
(2)对于HK2 rs656489位点,
扩增引物为:
HK2 rs656489正向扩增引物:
5’-ACGTTGGATGCTGGTGTCTAGCATTAGCTG-3’;
HK2 rs656489反向扩增引物:
5’-ACGTTGGATGTGATCTTGGACATGGGATGG-3’;
(3)对于HIF1-αrs10136168位点,
扩增引物为:
HIF1-αrs10136168正向扩增引物:
5’-ACGTTGGATGTCACCCTCTGATGCAGTTAC-3’;
HIF1-αrs10136168反向扩增引物:
5’-ACGTTGGATGCAGCTCTGTTCTTTACTGCC-3’。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述DNA标准品包括突变型标准品DNA,即阳性对照品,以及野生型标准品DNA,即阴性对照品。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述PCR反应液包括PCR Buffer,MgCl2,dNTP及Taq酶。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述PCR引物及PCR反应液各试剂组分配比为:1×PCR Buffer;MgCl2 25mM;dNTP 25mM;Taq酶5U/μl;PCR引物500nM;及适量超纯水。
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