[发明专利]基于培氟沙星类多克隆抗体检测氟喹诺酮类药物的试纸卡

说明书

本发明涉及基于培氟沙星类多克隆抗体检测氟喹诺酮类药物的试纸卡，属于免疫化学检测技术领域。本发明提供了基于培氟沙星类多克隆抗体的检测氟喹诺酮类药物的试纸卡，包括塑料盒体，所述塑料盒体一端设置有加样孔，设置在所述塑料盒体中的试纸条，所述试纸条包括支撑层，设置在所述支撑层上的样品垫、金标抗体结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫，所述硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线，所述检测线处设置有氟喹诺酮类药物包被抗原，所述质控线处设置有羊抗兔IgG，所述结合垫上灌注有胶体金标记的抗培氟沙星类多克隆抗体。本发明提供的基于培氟沙星类多克隆抗体检测氟喹诺酮类药物的试纸卡操作简便，灵敏度高，特异性强，检测范围广，易于大范围推广应用。

技术领域

本发明涉及免疫化学检测技术领域，具体涉及基于培氟沙星类多克隆抗体检测氟喹诺酮类药物的试纸卡。

背景技术

氟喹诺酮类药物(fluoroquinolones，FQs)是20世纪80年代之后研制并得到广泛应用的一类人工合成抗生素，具有良好的组织渗透性。氟喹诺酮类药物的作用机理是抑制细菌的DNA旋转酶，使酶不能在DNA双链上引入切口，破坏细菌的代谢和繁殖，达到迅速杀灭细菌的目的，其对革兰氏阳性和阴性杆菌、葡萄球菌和肺炎球菌均有很强的抗菌活性。最初这类药物用于治疗尿道感染，后来发展到治疗系统感染性疾病，主要用于泌尿系统感染、皮肤感染、呼吸道感染、消化道炎症、伤寒和败血症等疾病的治疗。由于它们具有吸收好、半衰期长、抗菌谱广、抗菌活性强、低毒高效、安全价廉，多数品种可以口服等许多优点，因此在临床中得到了广泛应用，并且在动物饲养中作为预防和治疗药物普遍使用，有时还作为饲料添加剂促进动物生长，提高生长速度与产量。

氟喹诺酮类药物在兽医临床上长期和大量使用，必然会导致其在动物性食品中的残留，从而给食品卫生及人类健康带来潜在的危害。研究表明：长期使用氟喹诺酮类抗生素易导致动物群体体内致病菌产生耐药性，并且这种耐药性可能由动物微生物向人类病原菌传播；而且该类药物在动物体内代谢缓慢，人体摄入后，会对中枢神经系统及关节部位造成不良反应，严重时，可引起食用者产生远期毒性及潜在的致癌、致畸、致突变效应。因此，氟喹诺酮类药物残留问题越来越引起人们的广泛关注。我国以及世界卫生组织、欧盟、美国、日本等国家和组织都将氟喹诺酮类药物列入限制使用的兽药药物清单中，并制订出相应的最高残留限量(maximum residue limit，MRL)和休药期，而且加大了其残留监管力度。欧盟规定：动物肌肉、肝脏和肾脏中二氟沙星、恩诺沙星(恩诺沙星+环丙沙星)、沙拉沙星等氟喹诺酮类兽药最高残留量为0.01-1.9mg/kg；美国和加拿大规定：氟喹诺酮为养蜂业禁用药物，蜂王浆中各种氟喹诺酮类药物MRL为5μg/kg；日本2006年5月29日开始实施“肯定列表制度”后，除有暂定标准的药物如恩诺沙星、噁喹酸等外，其余FQs均按10μg/kg的“一律标准”；我国规定FQs在牛奶中的MRL分别为：恩诺沙星(恩诺沙星+环丙沙星)为100μg/L，达氟沙星为30μg/L，氟甲喹为50μg/L。2015年9月9号，中华人民共和国农业部公告(第2292号)，自2016年12月31日起，停止经营、使用用于食品动物的洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、培氟沙星4种原料药的各种盐、酯及其各种制剂。

国内外用于FQs药物残留检测的方法较多，主要包括高效液相法(HPLC)以及与此相关的HPLC-UV、HPLC-FD、HPLC-DVD、LC-MS/MS，LC-ESI-MS/MS，另外还有荧光光谱法、高效毛细管电泳法、薄层色谱法、ELISA、胶体金试纸、微生物学方法和电解分析法等。胶体金标记免疫分析法是近年来迅速发展的一种新型分析技术，其特点是简便快速、成本低、无污染、无需培训，非常适合于现场检测，与ELISA相比，具有样品前处理简单，显色时间短(3-5min)，且所有试剂包含在一根试纸条上，无需仪器等优点，具有广阔的市场前景和应用价值。但目前，市场上销售的试纸卡同时检测的FQs兽药残留种类少，检测效率受到影响。因此，研制检测种类多的试纸卡对于保障动物性食品安全具有十分重要的意义。

发明内容