[发明专利]中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测试剂盒

说明书

本发明公开了一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测试剂盒，包括检测液和标准品；所述检测液中含有偶联了抗人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白抗体的胶乳颗粒，所述标准品为具有天然构型的重组中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白。这种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测试剂盒采用胶乳增强比浊法来测定样品中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的含量，相对于传统的NGAL检测试剂盒，检测灵敏度较高，此外，还具有操作简单、重复性好、耗时短等优点，不需要预处理样品且能够在全自动生化分析仪上使用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测试剂盒。

背景技术

在过去的几十年里人们对急性肾损伤(AKI)发病机理的认识和医疗技术水平都有了很大的提高，但AKI的发病率和病死率仍然居高不下。导致这一局面的一个主要原因是缺乏有效的早期诊断标志物。以血清肌酐(Serum creatinine,sCr)升高或排尿量为指标的RIFLE(Rise,Injury,Failure,Loss,End-stage renal disease)诊断系统是目前临床实践对AKI判定的标准方法。但由于受年龄、性别、肌肉的质量、肌肉新陈代谢、药物使用及水合作用等因素的影响，sCr水平变化很大。另一个事实是sCr水平往往在AKI发生几天后才有显著升高。因此，sCr虽然是可靠的肾功能标志蛋白并在AKI的诊断过程中起了重要的作用；但由于以上缺点，sCr不是理想的AKI早期诊断标志蛋白。另外根据排尿量指标进行AKI诊断常常由于手术后一些病人的少尿症、利尿药物的使用及复杂操作过程等因素的影响而不能很好的、有效的反映肾功能损伤情况。科研工作者不断寻找AKI早期诊断标志物，目前多种具有临床应用潜力的AKI标志蛋白被相继报导，如中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL，neutrophil gelatinase-associatedlipocalin)、肾损伤分子-1(kidney injurymolecμLe-1)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C)及白细胞介素-18(IL-18)等。2003年Devarjan,P.课题组在急性缺血再灌注和顺铂诱导的的急性肾损伤小鼠模型中，发现在损伤发生数小时内即可检测到NGAL的的表达明显升高。并且研究者发现NGAL升高较早期的肾脏损伤的其他指标出现的要早，此后，NGAL在肾损伤早期诊断中潜在价值越来越受到人们重视。

NGAL分子量约为25KD，共价结合于中性粒细胞明胶酶，是在包括肾小管在内的一些组织器官的中性粒细胞和上皮细胞中表达的小分子蛋白，对蛋白酶有天然的抗性。NGAL生理状态下是一种生长因子，主要参与了早期肾脏上皮的发生、生长。在正常组织包括肾脏，肺，胃及结肠的上皮组织中表达量较低。肾脏缺血再灌注损伤后，近曲小管上皮大量表达NGAL，且NGAL在肾脏中的表达会因不同原因的肾损伤而显著升高，并释放到尿液和血浆中。NGAL水平可在损伤的两个小时内，尿液和血液中NGAL水平将显著增加，比胱抑素C水平的升高提早24小时以上，而血清肌酐水平的升高则更晚。因此通过检测NGAL水平有助于在急性肾功能损伤发生后立即对肾功能进行评估并做出及时的处理，以降低死亡率。因此NGAL可作为急性肾衰的诊断标记物，是有效评价急性肾衰临床治疗效果及预后的良好指标。

通常50％以上的重症监护的病人都有不同程度的肾损伤，急性肾功能衰竭死亡率处于危重病死亡率前列。在过去的40年中，对急性肾衰竭的预测并没有得到明显发展，目前诊断方法只能针对肾衰竭中后期，如血清肌酐或胱蛋白酶抑制剂C，只在肾功能恶化后才有所表达，而这可能在器官损伤1天以上才显现甚至仍不明显。以此为指标来诊断肾损伤，指导临床用药，错过了肾损伤最佳治疗窗口，导致病人花费大幅增加、预后不良、发展成慢性肾病甚至死亡。另外NGAL测定相关领域有：心血管手术患者、病危人员、脓血性或出血性休克、肾脏手术、慢性肾病、心肾综合征、肝肾综合征、静脉X射线造影剂的反应和肾毒性治疗反映。