[发明专利]一种用于核酸样本采集的载体原件的制备方法

说明书

技术领域

本发明属生物技术领域，具体涉及核酸样本采集的载体原件制备方法。

背景技术

针对含有核酸样本进行检测广泛应用于临床和研究中。一般样本都是含有核酸的细胞液体样本，比如口腔黏膜、血液。从而样本的采集在临床和研究中也是极其重要的工作。

传统的临床含有核酸样本的采集，多为采集血清或体液样本，采集的样本需要进行预处理后方可使用，处理时间较长。

传统的研究方法则需要各种不同的含有核酸的样本来进行研究，而含有核酸的液体样本的运输和保存需要冷藏的控制，在实际运行中具有一定的操作难度。

干式含有核酸液体样本的采集方法可以满足上诉应用的需求。而干式采集法中含有核酸液体的载体原件则是关键。

目前主要常用的载体有棉花。这种载体使用非常简易，但容易出现如下问题：一是通过棉花获取含有核酸的细胞量不宜控制；而且操作过程中棉花容易被污染，从而造成分析结果的不准确；三是通过棉花将采集的样本转移至采样收集容器上，操作不方便而且还有转移效率的问题。

此外，也有使用滤纸和无纺布。但是这些载体有这一个共同的缺陷就是虽然采样过程的操作比较便捷，但是由于只是一种未经处理的吸水性采集载体，对于所采集的样本的保护和预处理能力较差。

本发明的制备方法，采用对吸水性采集载体进行细胞固定液的预处理，使得采集载体在采集样本后对样本中含有的核酸的保护更好，从而在操作和运输的便捷性上有了很大的提高，也提高了检测的效率。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于核酸样本采集的载体原件的制备方法，用于采集含有核酸的液体样本的载体原件的处理，使含有核酸液体样本在载体原件上更易于固定，同时也使含有核酸得到适度的裂解和解构。

本发明的制备方法采用如下技术方案。

（1）采集载体的原件，选择吸水性平面载体，比如滤纸、无纺布。

（2）将吸水性平面载体置于细胞固定液中，浸泡5分钟。

细胞固定液的成分为：20mM 曲拉通、10 mM 乙二胺四乙酸、25mM 三羟甲基氨基甲烷盐酸三羟甲基氨基甲烷、5mM异硫氰酸胍。

（3）将浸泡后的吸水性平面载体至于烘箱中，37℃ 1小时。

（4）将烘干后的吸水性平面载体紫外灭菌，紫外照射 30分钟。

（5）将灭菌后的吸水性平面载体，无菌安装于采集卡中，备用。

本发明制备的采集载体原件的样本采集步骤如下：

（1）将含有核酸的液体样本至于采集卡加样区的载体单元区内。

（2）将采样卡至于一个水平表面上，静置2分钟用于晾干液体样本。

（3）样本晾干后，将覆盖区的塑料薄膜的上层截取，进行封装和后续的运输。

本发明制备的采集载体原件采集样本后的检测前处理步骤如下：

（1）用取样器将采集含有核酸液体样本的载体原件直径为1.5厘米大小取下载体原件。

（2）将载体原件放置于200ul的10mM三羟甲基氨基甲烷盐酸三羟甲基氨基甲烷和1mM乙二胺四乙酸的溶液中，37℃ 10分钟。

（3）将温浴后的溶液用电泳法验证核酸含量后进行后续基因分析。

与已有技术相比，本发明有益效果体现在

1、本发明为临床和研究的含有核酸的液体样本提供了一种载体原件，使用过程中无需配套采集设备。

2、本发明制备的采集卡采集含有核酸的液体样本，无需离心等预处理，制备核酸原溶液时间仅需5分钟。

附图说明

图1是电泳图

1：血液基因组核酸电泳条带，M：核酸电泳标记

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明，但不作为对本发明的限定。

实施例

采集血样：

用滴管吸取20毫升的血液滴入细胞固定液处理后的滤纸上，使血液样本均匀涂抹于滤纸上的加样区内，在25℃的温度下晾干10分钟。

滤纸上的核酸析出：

用取样器在滤纸的加样区内采集直径为1.5厘米大小的含有血液样本的滤纸。

将滤纸放置于200ul的10mM三羟甲基氨基甲烷盐酸三羟甲基氨基甲烷和1mM乙二胺四乙酸的溶液中，37℃ 10分钟。

将温浴后的核酸溶液用电泳法验证，结果如图1。

1 为温浴后的含有血液基因组核酸溶液的电泳条带。

M 为核酸电泳标记。