[发明专利]聚乙二醇连接臂与所修饰多肽药物的偶合物

说明书

本发明公开聚乙二醇连接臂与所修饰多肽药物的偶合物，具体涉及一种聚乙二醇与促红细胞生成素模拟肽衍生物的偶合物及其制备方法及药物用途。具体涉及促红细胞生成素模拟肽衍生物与分支型或直链型mPEG偶联的缀合物，该缀合物比EPO具有更好的稳定性，可以防止EPO在体内的迅速降解，延长药物在血浆中的停留时间和循环半衰期，增强药物分子的体内生物活性。

技术领域

本发明的应用领域涉及生物制药领域，具体涉及一种聚乙二醇修饰的药物偶合物。

背景技术

聚乙二醇(poly(ethylene glycol))是一类聚醚类聚合物，其分子中含有大量乙氧基，能够与水形成氢键，具有高度的亲水性，在水溶液中有较大的水动力学体积，能改变药物在水溶液中的生物分配行为和溶解性，在其修饰的药物周围产生空间屏障，减少药物的酶解，避免在肾脏的代谢中很快被消除，并使药物能被免疫系统的细胞识别。聚乙二醇具有免疫学惰性，即使分子量高达5.9×106Da，本身的免疫原性也很低。聚乙二醇修饰的蛋白质一般构象不会改变，其结合物的生物学活性主要由结合物的蛋白质部分产生。临床上使用聚乙二醇修饰蛋白质时，未发现抗聚乙二醇抗体产生。聚乙二醇是经美国食品药品管理局(FDA)批准的极少数能作为体内注射药用的合成聚合物之一。

聚乙二醇修饰又称分子的PEG化(PEGylation)，是20世纪70年代后期发展起来的修饰方法。将活化的聚乙二醇与蛋白质分子相偶联，影响蛋白质的空间结构，最终导致蛋白质各种生物化学性质的改变：化学稳定性增加，抵抗蛋白酶水解的能力提高，免疫原性和毒性降低或消失，体内半衰期延长，血浆清除率降低等。

促红细胞生成素(Erythropoietin,简称EPO)是一种造血生长因子，是细胞生成过程中必需的一种糖蛋白。EPO含有165个氨基酸，分子量约为30.4kD，其中糖基化结构的分子量占40％左右，糖基化位点是Asn24、Asn28、Asn83和Ser126，含有由两对半胱氨酸组成的二硫键(Cys7-Cys61和Cys29-Cys33)，在人体中，EPO作用于骨髓造血细胞，刺激有丝分裂和红细胞前体的分化，促进红细胞系干细胞增生、分化，最终成熟为内分泌激素。由于EPO能促使红细胞增生，提高机体的血红蛋白总量，改善机体携氧能力，所以该激素在诊断和治疗各种原因导致的红细胞生成不足或红细胞产生缺陷血液疾病中有着广泛的应用。

天然存在的EPO分为两种类型，α型含35％的糖基，β型含26％的糖基。天然的hEPO(human erythropoietin，缩写为hEPO)制品一般是从贫血患者的尿和绵羊血中提取的，提取率非常低，且极不稳定，理化和生物性质难以测定，所以在20世纪80年代就开始rhEPO(重组人促红细胞生成素)的研究。