[发明专利]组合物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及细胞领域，特别涉及组合物及其应用。

背景技术

肝衰竭是多种因素引起的严重肝脏损害，导致其合成、解毒、排泄和生物转化等功能发生严重障碍或失代偿，出现以凝血机能障碍和黄疽、肝性脑病、腹水等为主要表现的一组临床症候群。近些年来，由于肝衰竭死亡的人数逐渐增多，据统计，美国每年约有万人死于肝功能衰竭，而我国每年死于此症的患者约万。急性肝衰竭是一种急性的严重肝功能障碍，其特点是起病急、病情危重、症状表现多样、肝细胞广泛坏死。目前治疗肝衰竭的主要手段为内科治疗、肝移植和细胞治疗等。内科治疗疗效有限，迄今为止尚未有对症的特效药。目前，肝移植虽已成为治疗终末期肝病的重要手段，但供体短缺、手术损伤、免疫排斥以及费用高昂等问题构成了肝移植技术发展的主要障碍。因此，开展具有侵入性小，并发症少等特点的干细胞移植成为最近治疗肝衰的研究热点。干细胞是一种未分化的细胞，有两个基本特征，一是自我复制能力，二是能分化成一种以上的功能细胞，根据分化潜能的大小，干细胞一般分成三类，第一类是全能干细胞即可以分类为功能一致的全能细胞。第二类是多潜能干细胞，它能分化成为身体中每种细胞类型，但是不能形成胎盘和胎儿发育所必须的支持组织。第三类是成体干细胞是一种将拥有终生自我复制或自我更新能力的干细胞。它分布于不同组织并可养成为各种类型细胞。

间充质干细胞，属于成体干细胞，是一种具有自我复制能力和多向分化潜能的成体干细胞，属于非终末分化细胞，可分化为脂肪、软骨、骨、肌肉、肌腿、神经、肝、心肌、胰岛细胞和内皮等多种组织细胞。间充质干细胞由于免疫原性低，成体组织来源丰富广泛存在于人体的骨髓、脂肪组织、新生儿脐带及胎盘等，易于分离，纯度高，无肿瘤细胞污染扩增时培养体系能统一，便于质控可制成种子细胞冷冻，多次使用，冷冻后细胞损失小潜伏性病毒和病原微生物的感染及传播几率比较低采集时对产妇及新生儿无任何危害及损伤采集方便，易于保存和运输，伦理学争议少。目前不少研究证明干细胞在体外进过特殊培养均有分化成为肝细胞的能力。

近年来骨髓来源的间充质干细胞，治疗因其有重现性好、低免疫原性、费用低、运作方便、容易等优势，成为继原位肝移植后又一治疗肝衰竭的有效方法。制备过程相对简单、易于收集、生物特性稳定、安全性能稳定、重复性好，病人可以在心理上接受，因此能满足临床应用的需求。增殖能力强，其具有贴壁性有利于细胞的纯化和培养，同时具有较强的分化能力、免疫原性低、避免了胚胎干细胞移植后可能产生畸胎瘤和伦理问题；它可以在异基因移植中长期存活并发挥正常的生理功能，而且自体移植不存在免疫排斥问题，因此新的治疗方法一在治疗有着极大的优势。

目前不少研究证明干细胞在体外进过特殊培养均有分化成为肝细胞的能力。证明造血干细胞可以体外培养可以分化成为肝细胞。研究证明骨髓来源的间充质干细胞体外分化培养可以分化成肝细胞。目前大鼠、大鼠和人的有关实验模型，提示骨髓来源细胞可以转化为肝细胞。目前关于不同来源干细胞治疗急性肝衰的报道也有很多。证明单个核骨髓细胞能治疗对乙酞基氨基酚引起的急性肝衰。有人得出结论，肝脏中某些部分损伤可能更适合用骨髓来源的干细胞进行修复。

Hwang,S.等人分别使用骨髓间充质干细胞和经HGF体外诱导1周或2周的骨髓间充质干细胞治疗肝衰竭大鼠，通过对肝功能血生化指标的检测，他们认为干细胞向肝干细胞和肝脏细胞分化的早期可能有利于肝细胞的再生和肝功能的重建，而成熟肝细胞移植可能会限制肝功能的恢复。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种组合物及其应用。该组合物对于防止和或治疗由局部缺血、药物如对乙酰氨基酚、病毒、肥胖症非酒精性脂肪性肝炎、以及阻塞胆管阻塞、肿瘤所引起的慢性肝损伤均有效。该组合物还可以预防肝衰竭、减缓慢性肝衰竭进展并去除有害的毒性。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种组合物，包括生长因子、白蛋白和骨髓间充质干细胞。

在本发明的一些具体实施方案中，所述生长因子选自肝细胞生长因子、前列腺素、胰岛素或胰高血糖素。

在本发明的一些具体实施方案中，所述组合物中肝细胞生长因子占组合物的含量为30μg/ml～60μg/ml、前列腺素占组合物的含量为4μg/ml～8μg/ml、胰岛素占组合物的含量为20U/ml～40U/ml、胰高血糖素占组合物的含量为3mg/ml～6mg/ml。

在本发明的一些具体实施方案中，所述组合物中所述白蛋白占组合物的质量百分含量为15～30％。