[发明专利]一种全面检测肉制品中N-亚硝胺含量的方法

说明书

本发明公开了一种全面检测肉制品中N‑亚硝胺含量的方法，包括以下步骤：称取粉碎好的肉制品，加入乙腈、正己烷及无水硫酸镁，涡旋，超声提取，离心，倾出上清液，保留乙腈层弃去正己烷层，再用乙腈重复提取肉制品1‑3次，合并提取液，减压旋蒸至近干，再用乙腈定容；然后用C18/PSA粉末净化定容溶液，收集的上清液即为待测液样品；用气相色谱串联质谱仪检测待测样品，配制标准溶液及绘制曲线，结果计算即可完成。本方法具有耗时少、干扰性小、特异性强、灵敏度高、操作简便、设备成本较低、准确度及精确度高等优点。

技术领域

本发明涉及食品安全领域，具体是一种全面检测肉制品中N-亚硝胺含量的方法。

背景技术

酒类、肉及鱼类腌制品、豆制品等食品中含有N-亚硝胺类化合物，该化合物为剧毒有机化合物，具有强烈的致癌、致畸和致突变性，是四大食品污染物之一。新鲜的食品中，亚硝胺类化合物的含量很低，但在运输、加工、储存等过程中很容易因缺氧、积热、微生物、霉变等因素产生各种各样的N-亚硝胺化合物；食品的来源不同、微生物种类不同、存放的时间不同，产生的N-亚硝胺化合物种类也会不同。

近年来，我国虽然制定了N-亚硝胺检测方法，即GB／T5009.26-2003《食品中N-亚硝胺类的测定》。但该测定方法主要存在以下不足：（1）该方法只针对有限的4种亚硝胺化合物，而在食品中最为常见的N-亚硝胺有9种之多，因此现有的国家标准不能有效满足食品安全监测的需要。（2）该标准中样品的提取采用水蒸气蒸馏法，该方法作为传统的前处理技术，能较好的完成目标成分的分离，但通常要多次萃取、长时间蒸馏才能保证回收率，并且需要进一步的转移、浓缩，操作较为繁琐。（3）该测定方法采用的是热能分析仪法和高分辨质谱法，对仪器的特异性要求高，且价格较为昂贵，不便于该方法的推广及应用。随着对食品安全关注度的日益提高，建立一种高效快捷、覆盖全面、高灵敏度和高选择性的N-亚硝胺检测方法显得尤为重要。

发明内容

本发明针对现有亚硝胺检测方法存在的问题，提供一种耗时少、抗干扰性强、特异性强、灵敏度高、操作简便、成本较低、准确度高可同时检测肉类制品中9种N-亚硝胺含量的方法。

为了实现以上目的，本发明采用的技术方案如下：

一种全面检测肉制品中N-亚硝胺含量的方法，包括以下步骤：

（1）样品提取：称取M g粉碎好的肉制品，加入乙腈、正己烷及无水硫酸镁，涡旋1-3min，超声提取10-30min，离心5-10min，倾出上清液，保留乙腈层弃去正己烷层，再用乙腈重复提取肉制品1-3次，合并提取液，减压旋蒸至近干，再用乙腈定容至V mL；

（2）净化：量取定容后的溶液至装有C18/PSA粉末的具塞离心管中，涡旋1-3min，离心3-5min，收集的上清液即为待测液样品；

（3）定性定量分析测定：取待测液样品进样，用气相色谱串联质谱仪分析检测，扫描N-亚硝胺的特征离子，得到待测样品的离子流色谱图，以N-亚硝胺的特征离子的保留时间和响应丰度比作为定性分析依据，以N-亚硝胺的特征离子响应强度作为定量分析依据；

（4）配制标准溶液：配制浓度为1.0 ng/mL~1000 ng/mL的N-亚硝胺系列标准溶液，取标准溶液进样到气相色谱串联质谱仪，根据检测结果绘制标准曲线，以外标曲线法计算样品中的N-亚硝胺的浓度C ；

(5)结果计算：按以下公式计算肉制品中N-亚硝胺的含量X，X的单位为µg/kg；

。

进一步地，以上所述肉制品包括畜肉、禽肉、鱼肉的腌制品或熏制品。

进一步地，以上所述乙腈与正己烷的体积比0.5-2:1。

进一步地，以上所述肉制品与无水硫酸镁的质量比为2-4:1。