[发明专利]多膜片蛋白质印迹杂交仪及其实验操作方法

说明书

本发明涉及蛋白印迹实验设备领域，具体涉及一种多膜片蛋白质印迹杂交仪及其实验操作方法，其仪器包括：底壳体和立壳体，立壳体内设置有传送定位装置，底壳体内设置有摇床装置，摇床装置的上部设置杂交槽组，该杂交槽组包括：独立的封闭液槽、一抗杂交槽、洗脱槽和二抗杂交槽，并在洗脱槽上设置一个进排液装置；通过传送定位装置将转膜完成的PVDF膜片依次浸入封闭液槽、一抗杂交槽、洗脱槽、二抗杂交槽，再返回洗脱槽，完成杂交过程。采用以上方案，本发明所提出的一种多膜片蛋白质印迹杂交仪及其实验操作方法，仪器结构简单，实验操作方便，支持多膜片同时实验，能够减轻实验人员工作强度的同时，提高工作效率，降低实验成本。

技术领域

本发明涉及蛋白印迹技术领域，具体涉及一种多膜片蛋白质印迹杂交仪及其实验操作方法。

背景技术

蛋白质印迹杂交(Western blot)是生物学实验中最为常用的技术之一，实验操作主要是在凝胶电泳的基础上，将电泳分离的蛋白质组分从凝胶转移至一种固相支持体上，通过抗体与附着于固相支持物的靶蛋白所呈现的抗原表位发生特异性免疫反应，之后进行染色检测的过程。

其中让抗体与靶蛋白发生特异性免疫反应的蛋白质杂交过程可以细分为封闭、杂交孵育和洗脱三步，即将电泳转膜后的PVDF(即聚偏二氟乙烯膜)膜置于含脱脂奶粉或牛血清白蛋白(BSA)的封闭液中，慢速摇动封闭，持续时间40-60分钟；之后在含第一抗体的一抗孵育液中慢速摇动进行一抗孵育，持续时间60分钟；然后用洗脱液快速摇动洗脱3次，每次5-10分钟；接着在含第二抗体的二抗孵育液中慢速摇动进行二抗孵育，持续时间40分钟；最后用洗脱液快速摇动洗脱3次，每次5-10分钟，得到符合要求的蛋白膜。其过程十分繁琐，持续操作时间长，且需要机械性的多次重复操作，花费实验人员很多的时间和精力，同时，人为操作的不稳定也容易造成试验结果的差异，造成实验结果的不准确。

目前已经有全自动的蛋白质印迹杂交仪，能够直接上样，一站式完成蛋白电泳、转膜、杂交、染色的全过程，得到稳定的实验结果，极大地减轻了实验人员的工作强度。只是，这类仪器及耗材价格十分昂贵，既使对于拥有较多科研经费的实验室，相关的费用也难以承担；而且，多数的仪器仍然只能进行单片PVDF膜片的杂交试验，实验效率低，不能满足有些需要多膜片同时实验的实验需求，适用范围窄，支持多膜片同时实验的仪器，仪器价格又会在本就昂贵的价格上再次提高。因此，如何在节约实验成本的情况下，提高实验的自动化程度和工作效率，实现多膜片同时实验，减轻实验人员的工作强度，具有非常积极的意义。

发明内容

为解决上述问题，本发明仅针对蛋白质印迹杂交实验中最繁琐的杂交过程，提出的一种多膜片蛋白质印迹杂交仪及其实验操作方法，其仪器结构简单，实验操作方便，支持多膜片同时实验，能够减轻实验人员工作强度的同时，提高工作效率，降低实验成本。