[发明专利]一种血栓心脉宁片中五种人参皂苷类成分的含量测定方法

说明书

本发明提供了一种血栓心脉宁片中人参皂苷类成分的含量测定方法。血栓心脉宁片是一种中药制剂，在临床上多用于气虚血瘀所致的中风、胸痹症见头晕目眩，半身不遂，胸闷心痛，心悸气短。血栓心脉宁片中含有人参茎叶皂苷，本发明采用超高效液相色谱‑质谱联用法同时测定血栓心脉宁片中人参茎叶的特征性成分20(S)‑人参皂苷F1及人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rd五种皂苷类成分，方法灵敏度高，准确，可用于血栓心脉宁片的质量控制。

技术领域

本发明涉及到一种血栓心脉宁片中人参皂苷类成分的含量测定方法，属中药技术领域，具体的，涉及一种血栓心脉宁片中人参类皂苷成分为人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁、20(S)-人参皂苷F₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rd五种成分同时测定的含量测定方法。

背景技术

血栓心脉宁片收载于《中国药典》2015年版一部，由川芎、丹参、水蛭、毛冬青、牛黄、麝香、槐花、人参茎叶皂苷、冰片、蟾酥制成，具有益气活血，开窍止痛的功能，用于用于气虚血瘀所致的中风、胸痹症见头晕目眩，半身不遂，胸闷心痛，心悸气短；缺血性中风恢复期、冠心病心绞痛见上述证候者。《中国药典》2015年版中血栓心脉宁片片的标准中仅对人参皂苷Re和人参皂苷Rg₁进行了含量测定，众所周知，人参皂苷Re和人参皂苷Rg₁为人参、西洋参、三七等五加科植物的共有成分，专属性差，为提高血栓心脉宁片的质量控制水平，有必要增加血栓心脉宁片中人参茎叶皂苷的特有成分(如20(S)-人参皂苷F₁)及其他皂苷类成分的测定，有利于控制产品质量，保障药品的安全有效，质量可控。

发明内容

本发明的目的在于提供了一种血栓心脉宁片中五种人参皂苷类成分的含量测定方法，五种人参类皂苷成分为20(S)-人参皂苷F1及人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rd。

本发明测定方法采用超高效液相色谱法-质谱联用法，其色谱条件及测定法如下：

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为乙腈，流动相B为水，进行梯度洗脱，洗脱梯度为：0-2分钟，流动相A由20％线性变化到50％，2.01分钟，流动相A变为80％，保持3分钟；流速：0.5ml/min；质谱条件，离子源：电喷雾离子源(ESI源)；监测模式：负离子多反应监测模式；脱溶剂气温度：500℃；毛细管电压：3.00kV；锥孔电压：20V；监测离子对及相关电压参数设定如下表：

标准储备溶液：分别称取人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁、20(S)-人参皂苷F₁、人参皂苷Rb₁、人参皂苷Rd标准品各10mg，置100ml量瓶中，加甲醇使溶解并定容至刻度，摇匀，即得质量浓度为0.1g/L的标准储备溶液；

系列标准溶液：按照人参皂苷Re、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rd、人参皂苷Rb₁系列标准溶液浓度为0.01μg/ml-1.00μg/ml，20(S)-人参皂苷F₁系列标准溶液浓度为0.05μg/ml-1.00μg/ml，精密吸取标准储备溶液，置10mL量瓶中，以20％乙腈水溶液稀释并定容至刻度，得不同浓度的系列标准溶液。

供试品溶液的制备：取血栓心脉宁片，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80％甲醇25mL，密塞，称定重量，置水浴中加热回流60-90分钟，取出，放冷，再称定重量，用80％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液；再精密量取续滤液1ml，置100ml量瓶中，以20％乙腈水溶液稀释并定容至刻度，0.2μm微孔滤膜过滤，滤液作为待测液，备用；