[发明专利]天然细胞外基质生物膜及其制备方法与应用

权利要求书

1.天然细胞外基质生物膜的制备方法，其特征在于，以经过去抗原处理的天然细胞外基质为材料，将2-10层规格相同的单层材料交错或平行叠加放置，使用夹具使各层紧密贴合，在真空条件下冻干处理，然后放入真空烘箱中进行热交联处理，然后取下夹具，得到的细胞外基质生物膜经钴60辐照或环氧乙烷灭菌，即得。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述去抗原处理的具体操作如下：取新鲜的天然细胞外基质，依次经消毒、机械剥除、脱细胞和去垢处理。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，对新鲜的天然细胞外基质进行消毒处理，将新鲜的天然细胞外基质在消毒剂中浸泡45-65min，每隔10min搅拌一次；然后用纯化水清洗上述消毒后的天然细胞外基质直至pH为6.0-7.0；

其中，所述消毒剂为双氧水、过氧乙酸溶液或乙醇中的至少一种。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述消毒剂为过氧乙酸溶液，浓度为0.5-1％。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，过氧乙酸溶液的浓度为0.5％。

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，天然细胞外基质经消毒后进行机械剥除，然后置于脱细胞液中浸泡10-15min，然后于水中浸泡，并用水冲洗进行去垢处理；

所述脱细胞液为高渗盐溶液、SDS溶液、碱溶液或酶液。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述脱细胞液为碱溶液，包括氢氧化钠、氢氧化钙、碳酸钠或氨水溶液。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述脱细胞液为氢氧化钠溶液，浓度为0.01-0.5M。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述氢氧化钠溶液的浓度为0.05M。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述天然细胞外基质来自于同种异体或异种生物的组织材料，包括牛真皮基质、牛心包基质、牛腹膜基质、猪膀胱粘膜下层基质、猪小肠粘膜下层基质、猪腹膜基质、人真皮基质。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述天然细胞外基质为猪小肠粘膜下层基质。

12.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将4层规格相同的单个材料交错或平行叠加放置。

13.根据权利要求1-12任一项所述的方法，其特征在于，真空条件下冻干处理具体操作如下：在-40～-80℃条件下预冻2-6h，然后进行真空干燥处理，干燥时间16-24h，最终温度上升到4-20℃。

14.根据权利要求13所述的方法，其特征在于，真空条件下冻干处理具体操作如下：-80℃预冻4h。

15.根据权利要求1-12任一项所述的方法，其特征在于，热交联处理具体操作如下：冻干的材料在真空烘箱中热处理1-8h，真空度≤100Pa，温度为100-140℃。

16.根据权利要求15所述的方法，其特征在于，热交联处理具体条件如下：120℃热处理4h。

17.根据权利要求1-16任一项所述方法制备的天然细胞外基质生物膜。

18.权利要求17所述天然细胞外基质生物膜在生物医用材料领域中的应用。