[发明专利]拟南芥基因REM16的表达载体及其在调控植株开花期中的应用

说明书

本发明公开了拟南芥基因REM16的表达载体及其在调控开花期中的应用，本发明经过实验分析证明，拟南芥基因REM16具有花期调控的功能，并获得了拟南芥基因REM16的过表达载体和基因沉默载体，过表达REM16基因引起转基因拟南芥植株中开花相关基因表达变化而促进拟南芥提早开花，与野生型植株的开花时间相比表现为早花性状；沉默REM16基因引起转基因拟南芥植株中开花相关基因表达变化而延迟拟南芥开花，与野生型植株相比表现为晚花性状。通过分析转基因株系开花相关基因的表达从而确定REM16基因调控开花的功能。本发明的技术方案对于植物花期调控具有重要意义。

技术领域

本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及拟南芥基因REM16的表达载体及其在调控植株开花期中的应用。

背景技术

微丝解聚因子（ADF/cofilin）广泛存在于真核细胞中，对维持细胞的形态结构、细胞运输、能量转换、信息传递、细胞分裂及分化等起着非常重要的作用。前期研究表明，拟南芥微丝解聚因子ADF1表达量变化会影响植物的开花期，ADF1表达量的降低导致开花延迟。野生型拟南芥约在35±1天开花，有17片莲座叶；而ADF1基因沉默植株开花较野生型延迟2周，莲座叶数目增加至26片。其后，人们通过基因敲除深入解析ADF在植物生长发育中的分子功能。拟南芥adf4突变体具有更长的下胚轴和表皮细胞。拟南芥ADF9的突变体（adf9-1，adf9-2）植株的顶端优势增强，其花序的二级分枝数目少于野生型，但分枝的长度比野生型长；长日照生长条件下突变体开花时间早于野生型，同时莲座叶数目比野生型少，而短日照生长条件下跟野生型相比没有明显差异。 此外，ADF9能调控开花转换时期相关基因的表达量。这些研究表明，ADF蛋白直接参与植物生长发育及花期调控，但其调控的目标基因、参与的关键调控因子及分子调控机制等都不清楚。

发明内容

本发明提供了拟南芥基因REM16的表达载体及其在调控植株开花期中的应用。本发明以拟南芥ADF1为诱饵，通过酵母双杂交从拟南芥cDNA文库中筛选得到了十几个ADF1互作蛋白分子，获得本发明所述的基因REM16(基因编号为AT3G53310)，并通过实验证明了其调控拟南芥花期的功能。

为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明提供了一种拟南芥基因REM16的过表达载体pCambia1300-221-HA，所述过表达载体pCambia1300-221-HA的核苷酸序列如序列表SEQ ID No:2所示，所述过表达载体含有如序列表SEQ ID No:1所示的基因REM16，所述过表达载体pCambia1300-221-HA用于调控拟南芥花期提前。

进一步的：将基因REM16和带有XbaI和KpnI酶切位点的pCambia1300-221-HA载体分别进行KpnI和XbaI的双酶切，再按照基因片段和载体4：1的比例在T4连接酶的催化下进行16℃过夜连接20h制得。

本发明提供了一种拟南芥基因REM16的基因沉默载体pB7GWIWG2(II).0，所述基因沉默载体pB7GWIWG2(II).0的核苷酸序列如序列表SEQ ID No:3所示，所述基因沉默载体pB7GWIWG2(II).0用于调控拟南芥花期延迟。