[发明专利]DNA免疫吸附剂的制备方法

说明书

本发明提供一种DNA免疫吸附剂的制备方法，通过将干燥的碳化树脂倒入到DNA包膜溶液中，搅拌、过滤、烘干，然后再加入乙醇或乙醇乙醚混合溶剂，搅拌、过滤、干燥、冷却，得到成品DNA免疫吸附剂。该方法采用“湿蚀”包膜法，在对吸附剂进行一次包膜后，再加入适当的有机溶剂部分溶解包膜溶液，从而将黏附于膜层表面的DNA“局部释放”，使溶解后的包膜溶液再次成膜，使包膜厚度更加均匀，从而达到提高DNA有效吸附率的效果。

技术领域

本发明涉及血液净化领域，具体涉及一种碳化树脂DNA免疫吸附剂的制备方法。

背景技术

系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosus,以下简称SLE)是一种常见的累及多系统多器官的自身免疫性疾病。由于患者机体免疫调节障碍及自身免疫耐受状态被打破，产生多种针对自身组织的抗体，导致组织和器官的损伤，这些抗体主要是抗Sm抗体、抗核抗体以及抗DNA抗体。其中抗DNA抗体可分为抗单链DNA抗体(抗ss-DNA抗体)和抗双链DNA抗体(抗ds-DNA抗体)。

根据国内外临床及基础研究表明，抗ds-DNA抗体的滴度与疾病严重程度及活动性呈正相关。最近几年，激素及免疫抑制剂的应用使SLE患者的愈后效果得到明显改善，但依旧存在很多患者药物疗效不显著的现象，过度的免疫抑制治疗所引起的感染是引起SLE患者死亡的主要原因。另外，多方面研究证实，抗双链DNA抗体(抗ds-DNA抗体)与DNA结合成为免疫复合物在肾小球基底膜沉积，或ds-DNA抗体直接作用于肾小球抗原，从而造成SLE患者的肾损伤。

使用DNA免疫吸附(IA)对患者进行血液灌流，是近二、三十年发展起来的新型疗法。Jones,Frank R(EP0272792A1,1987)对这种方法作了详细说明。DNA免疫吸附剂的吸附作用是依靠DNA对致病性抗ds-DNA抗体的特异识别作用，清除患者血液中的致病物质，缓解病情，改善患者的免疫功能，从而逐渐恢复健康。

美国的TermanDS等人(Lancet,1979,2(8147):824-7)首次使用活性炭为载体材料，采用火棉胶包膜固定DNA，得到DNA免疫吸附剂用于血液灌流治疗一名重度SLE患者，使患者生命延长，从此开辟了DNA吸附剂治疗SLE的先河。使用火棉胶包膜，虽使DNA免疫吸附剂的安全有效性得到了保证，但吸附率仅为50％左右。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种可提高DNA免疫吸附剂吸附率新的DNA免疫吸附剂的制备方法。

本发明提供一种DNA免疫吸附剂的制备方法，包括以下步骤：

步骤一：吸附剂包膜

步骤1.1将干燥的碳化树脂倒入到DNA包膜溶液中，搅拌、过滤、烘干，其中所述碳化树脂与所述DNA包膜溶液的体积比为1：(2-4)；

步骤1.2向步骤1.1所得产物中加入有机溶剂，所述碳化树脂与所述有机溶剂的体积比为1：(0.5-1)，所述有机溶剂为乙醇或乙醇乙醚混合溶剂，所述乙醇乙醚混合溶剂中乙醇的体积百分比浓度至少为60％；

步骤二：将步骤一所得产物搅拌、过滤、干燥、冷却，得到成品DNA免疫吸附剂。

上述方法采用“湿蚀”包膜法，在对吸附剂进行一次包膜后，再加入适当的有机溶剂部分溶解包膜溶液，从而将黏附于膜层表面的DNA“局部释放”，使溶解后的包膜溶液再次成膜，使包膜厚度更加均匀，固定DNA，从而达到提高DNA有效吸附率的效果。其中，有机溶剂可以是乙醇或乙醇乙醚混合溶剂。当有机溶剂为乙醇乙醚混合溶剂时，混合溶剂中乙醇优选的体积百分比浓度为不低于60％。更为优选的，有机溶剂为乙醇乙醚混合溶剂，其中乙醇的体积百分比浓度为70％-90％，此种情况下，吸附率可达90％。

更好的方案是步骤一中的DNA包膜溶液通过包含以下步骤的方法配制：