[发明专利]一种液相色谱法测定类胡萝卜素的流动相配方及其应用

说明书

本发明公开一种液相色谱法测定类胡萝卜素的流动相配方及其应用，属于液相色谱分离代谢小分子的方法领域。该流动相配方包括以下体积百分比的成份：A1相：90％～100％甲醇‑水；B1相：90％～100％叔丁基甲醚‑甲醇。本发明提供的一种液相色谱法测定类胡萝卜素的流动相配方，可以简单，快速(整个过程可在40min之内完成)，准确，并可以得到各组份独立，峰型好，线性关系良好，加标回收率高，相对偏差小的7～10种类胡萝卜素色谱图和测试结果。

技术领域

本发明属于液相色谱分离代谢小分子的方法领域，特别涉及一种液相色谱法测定类胡萝卜素的流动相配方及其应用。

背景技术

类胡萝卜素作为小分子特殊代谢物，可有效清除自由基、有显著的抗氧化、提高人体免疫力、延缓衰老、防癌抗癌等保护人类健康具有积极重要的作用。由于人体自身不能合成该类物质，补充人工合成的此类物质对防病抗癌没有效果，所以从自然界食物中摄取成为了唯一必然的获得方式。食物中分布的类胡萝卜素主要有叶黄素、玉米黄素、α-隐黄素、β-隐黄素、α-胡萝卜素，β-胡萝卜素、γ-胡萝卜素、(6R)-δ-胡萝卜素、ε-胡萝卜素等，而高效液相色谱法具有分离效能高，分析速度快，成本低廉等优点，是应用最广最适用于食物中此类物质的分离测定方法。类胡萝卜素物质之间有些化学结构极为相似，有些为同分异构体，所以同时将这类物质在C18柱上分离比较困难，而C30柱的出现为此提供了新的分离方法。目前，使用C30柱液相色谱法多为分离单一或少数几种类胡萝卜素的测定方法，同时测定五种或以上多种的方法中，常会出现峰型不好，峰分不开，相对偏差大，响应值低等问题。

发明内容

为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的目的在于提供一种液相色谱法测定类胡萝卜素的流动相配方。

本发明的另一目的在于提供上述液相色谱法测定类胡萝卜素的流动相配方的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种液相色谱法测定类胡萝卜素的流动相配方，包括以下体积百分比的成份：

A1相：90％～100％甲醇-水；

B1相：90％～100％叔丁基甲醚-甲醇(又名甲基叔丁基醚，简称MTBE)。

进一步的改进在于：包括以下质量或体积百分比的成份：

A相：90％A2相+10％B2相；

B相：10％A2相+90％B2相。

其中，

A2相：90％～100％甲醇-水，含有0～0.5M乙酸铵和0～0.5％(W/V)2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(简称BHT)；

B2相：90％～100％叔丁基甲醚-甲醇，含有0～0.5％(W/V)BHT。

优选地，

A2相：97％甲醇-水，含有0～0.1M乙酸铵和0～0.15％(W/V)2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(简称BHT)；

B2相：100％MTBE，含有0～0.2％(W/V)BHT。

更优选的，

A2相：97％甲醇-水，含有0.05M乙酸铵和0.1％(W/V)2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(简称BHT)；

B2相：100％MTBE，含有0.1％(W/V)BHT。