[发明专利]细胞分离器具表面处理方法、相关器具、外周血稀有细胞或循环肿瘤细胞快速高效分离方法有效
申请号: | 201611192144.7 | 申请日: | 2016-12-21 |
公开(公告)号: | CN108220233B | 公开(公告)日: | 2021-07-09 |
发明(设计)人: | 白艳军;陶晟;王珊 | 申请(专利权)人: | 上海透景诊断科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078;C12N5/09;C12M1/42 |
代理公司: | 上海唯源专利代理有限公司 31229 | 代理人: | 曾耀先 |
地址: | 201400 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 分离 器具 表面 处理 方法 相关 外周血 稀有 循环 肿瘤 快速 高效 | ||
1.一种细胞分离器具表面处理方法,其特征在于,采用纤维蛋白原封闭处理细胞分离器具的接触细胞表面,其中,所述纤维蛋白原是人纤维蛋白原或牛纤维蛋白原,所述纤维蛋白原采用纤维蛋白原溶液的形式,将所述纤维蛋白原溶液浸润所述的细胞分离器具的接触细胞表面进行所述封闭处理,所述纤维蛋白原溶液是0.1%(w/v)-60%(w/v)的纤维蛋白原溶液,所述封闭处理的时间为15分钟-60分钟,所述细胞分离器具的表面材质为PP或硅胶,所述细胞分离器具用于分离淋巴细胞或外周血稀有细胞。
2.如权利要求1所述的细胞分离器具表面处理方法,其特征在于,所述细胞分离器具是液体盛放容器、液体流经管路或移液吸头。
3.如权利要求2所述的细胞分离器具表面处理方法,其特征在于,所述液体流经管路的内径为2mm-15mm,所述液体流经管路的外径不超过20mm。
4.如权利要求3所述的细胞分离器具表面处理方法,其特征在于,所述液体流经管路的内径为5mm-10mm。
5.一种表面处理的细胞分离器具,其特征在于,采用权利要求1-4任一项所述的细胞分离器具表面处理方法处理形成。
6.一种外周血稀有细胞快速高效分离方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)分离外周血中的白细胞,并采用细胞稀释液重悬浮所述白细胞得到白细胞溶液;
(2)将磁球-白细胞表面生物标志物抗体与所述白细胞溶液混合孵育获得孵育溶液;
(3)将内壁采用纤维蛋白原封闭的环形管路的一部分置于磁场中,采用另外的所述细胞稀释液稀释所述孵育溶液获得孵育稀释液,然后使所述孵育稀释液在所述环形管路中循环流动,通过所述磁场吸附所述孵育稀释液中的所述磁球,收集所述环形管路中的液体组分,其中,所述纤维蛋白原是人纤维蛋白原或牛纤维蛋白原,所述纤维蛋白原采用纤维蛋白原溶液的形式,将所述纤维蛋白原溶液浸润细胞分离器具的接触细胞表面进行封闭处理,所述细胞分离器具是所述环形管路,所述纤维蛋白原溶液是0.1%(w/v)-60%(w/v)的纤维蛋白原溶液,所述封闭处理的时间为15分钟-60分钟,所述环形管路的表面材质是硅胶。
7.如权利要求6所述的外周血稀有细胞快速高效分离方法,其特征在于,在所述步骤(1)中,采用密度梯度离心或红细胞裂解方法去除所述外周血中的红细胞和血小板。
8.如权利要求6所述的外周血稀有细胞快速高效分离方法,其特征在于,在所述步骤(2)中,所述白细胞表面生物标志物抗体是CD45抗体。
9.如权利要求6所述的外周血稀有细胞快速高效分离方法,其特征在于,在所述步骤(3)中,所述环形管路的内径为2mm-15mm,所述环形管路的外径不超过20mm。
10.如权利要求9所述的外周血稀有细胞快速高效分离方法,其特征在于,在所述步骤(3)中,所述环形管路的内径为5mm-10mm。
11.如权利要求6所述的外周血稀有细胞快速高效分离方法,其特征在于,在所述步骤(3)中,在所述循环流动之前将所述的环形管路的一部分挤压成扁平状管路,所述扁平状管路的距离较短的两个相对管壁之间的间距为1mm-10mm。
12.如权利要求6所述的外周血稀有细胞快速高效分离方法,其特征在于,在所述步骤(3)中,所述循环流动的速度为每分钟0.1ml-10ml。
13.如权利要求12所述的外周血稀有细胞快速高效分离方法,其特征在于,在所述步骤(3)中,所述循环流动的速度为每分钟0.2ml-5ml。
14.如权利要求13所述的外周血稀有细胞快速高效分离方法,其特征在于,在所述步骤(3)中,所述循环流动的速度为每分钟0.5ml-1ml。
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