[发明专利]一种诱导桡足类产生滞育卵的方法

权利要求书

1.一种诱导桡足类产生滞育卵的方法，其特征在于包括以下步骤：

1)藻液培养；

2)海水处理；

3)太平洋纺锤水蚤的培养；

对太平洋纺锤水蚤先进行2个世代驯化培养，将已驯化后的太平洋纺锤水蚤所产卵孵化得无节幼体T<12h，在解剖镜下挑选活力好的待用；

4)诱导条件设置，具体方法如下：

诱导条件如下：水温31℃，光照周期为12L︰12D，饵料为球等鞭金藻和海洋原甲藻混合液，微藻细胞密度为6.5×10⁷+1.3×10⁵个/ml，设置10个平行；太平洋纺锤水蚤产滞育卵时节主要为春末夏初，影响其产滞育卵的主要因素为温度和光照周期；

5)滞育卵筛选与收集，具体方法如下：

每组100只无节幼体放置于1L结晶皿中，按照步骤4)的诱导条件进行试验，每组均隔天换水，当太平洋纺锤水蚤开始产卵时，用48μm的筛绢收集卵，每24h收集一次，共收集5天，记录总产卵个数，在解剖镜下观察每天收集卵，外膜粗糙不平整且带有刺状突起的卵为滞育卵，筛选出形态完整实心的滞育卵，并记录滞育卵个数。

2.如权利要求1所述的一种诱导桡足类产生滞育卵的方法，其特征在于在步骤1)中，所述藻液培养的具体方法为：

将微藻接种于f/2培养液中培养至对数生长期，待用；所述微藻采用球等鞭金藻和海洋原甲藻，所述培养的条件为盐度27±1、光照周期12L︰12D、温度22～24℃。

3.如权利要求1所述的一种诱导桡足类产生滞育卵的方法，其特征在于在步骤2)中，所述海水为天然海水，所述海水处理的方法用20μm筛绢筛去浮沙与杂物，灭菌并连续充气24h，后调配至盐度27±1。

4.如权利要求1所述的一种诱导桡足类产生滞育卵的方法，其特征在于在步骤3)中，所述进行2个世代驯化培养的饵料为球等鞭金藻和海洋原甲藻混合投喂，水温28±0.5℃，光照周期12L︰12D，光照强度2045lux，盐度27±1。