[发明专利]一种胡萝卜软腐欧文氏菌、其分泌的植物免疫激活蛋白及应用

说明书

本发明公开了一种胡萝卜软腐欧文氏菌，保藏号为：CGMCC No.11751，其分泌的植物免疫激活蛋白HrpN_EccPR具有防治植物软腐病的效果。本发明还公开了所述植物免疫激活蛋白HrpN_EccPR的蛋白序列以及表达该蛋白的基因序列，并进一步提供了获得所述植物免疫激活蛋白的方法。本发明利用筛选出的保藏号为CGMCC No.11751的菌株产生的激活蛋白HrpN_EccPR粗品对植物尤其是大白菜软腐病有良好的拮抗作用，其能够有效防治大白菜软腐病的发生。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种一种胡萝卜软腐欧文氏菌、其分泌的植物免疫激活蛋白及应用。

背景技术

软腐欧文氏菌是一种广泛的致病菌，主要发生在大白菜、卷心菜、菜花、马铃薯等作物上，主要为害叶、茎及块茎。叶染病近地面老叶先发病，病部呈不规则暗褐色病斑，湿度大时腐烂。近些年来，由于多方面的原因，重大病害出现的频率和面积明显增加，造成的产量损失都在50-60%左右。而这些蔬菜是我国北方地区不可缺少的重要蔬菜，但每年因病害的损失估计可达数十亿元。为了对付严重的这些蔬菜软腐病害，农业生产者大量使用化学农药。化学农药的施用也确实对蔬菜病害的控制做出了巨大的贡献。但是，化学农药的大量施用也正在显示着严重的负面影响。因此，随着生物防治、绿色农业等呼声日益高涨，植物抗病免疫技术的研究成为近年兴起的重要研究领域。

植物免疫抗病激活剂是一些生物和非生物因子，能够诱导植物独特的生理状态，植物能够更好或更快或者既好又快的调配防卫反应的生理状态，使植物防御病虫害的状态处在临界，达到一触即发，当病害在侵染植物时，植物会在短时间内借助于诱导因子激发植物整体的抗性水平，调动整个植物的免疫能力，激活植物自身抗病相关基因的表达，抵抗病原物的侵染，自身不对病原菌起作用，不会使病原菌产生抗药性，用量低、高效、诱导的植物抗病谱广、抗病持续时间长，这对于植物病害的可持续控制具有重要的意义。

目前利用植物免疫激活剂生物防治蔬菜病害的研究相对较少，因此，迫切需要筛选出一种能够高效分泌植物蛋白激活剂的微生物菌株，从而通过植物免疫激活剂降低软腐欧文氏菌给蔬菜生产带来的危害。

发明内容

本发明的目的在于克服目前利用化学农药防治十字花科植物软腐病带来的环境危害，提供一种能够防治软腐病害，尤其是能够高效拮抗大白菜软腐病害的植物免疫蛋白激发子，并且本发明还提供了一种分泌上述植物免疫激活蛋白的生物菌株，并提供其能够表达该蛋白的基因序列和蛋白质序列，本发明还提供工程菌构建获得免疫激活蛋白。

为了达到上述发明目的，本发明所采用的技术方案如下：

本发明所述的胡萝卜软腐欧文氏菌Erwinia carotovora pv. Carotovorastrain Ecc 36（简称Ecc36）于2015年11月27日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心进行了保藏，保藏号为：CGMCC No. 11751。

进一步的，本发明所述的Ecc36能够分泌植物免疫激活蛋白HrpN_EccPR，该蛋白序列如SEQ ID NO:1所示。

进一步的，本发明所述的植物免疫激活蛋白HrpN_EccPR能引起植物对病原菌的拮抗作用。

进一步的，本发明所述的植物免疫激活蛋白HrpN_EccPR表达基因hrpNecc36的序列如SEQ ID NO:2所示。